屈側網(wǎng)狀色素沉著癥的臨床、病理、超微結構和致病基因定位的研究.pdf

1、屈側網(wǎng)狀色素沉著癥(Reticularpigmentedanomalyoftheflexures，RPAF,OMIMnumber：179850)又稱Dowling-Degos病(Dowling-Degosdisease，DDD)，是一種是一種少見的常染色體顯性遺傳性皮膚病。臨床特征是對稱性的褐色斑疹，漸擴展融合成網(wǎng)狀，好發(fā)在腹股溝、股內(nèi)側、腋下、腕、頸等屈側部位，多于青春期發(fā)病。屈側網(wǎng)狀色素沉著至今報道的文獻不多，至今大約50篇屈側網(wǎng)狀

2、色素沉著文獻，多為個案報道。 目的： (1)研究屈側網(wǎng)狀色素沉著癥的臨床表現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)該病臨床表現(xiàn)新特點。 (2)研究屈側網(wǎng)狀色素沉著癥的病理、超微結構的變化。 (3)在染色體上定位屈側網(wǎng)狀色素沉著癥致病基因。 方法： (1)對一個屈側網(wǎng)狀色素沉著癥大家系進行實地調(diào)查，記錄每位患者的發(fā)病年齡、性別、皮損的部位和特點，在獲得患者同意的情況下拍照并抽血，分析它們的臨床和遺傳特點。 (2)對

3、家系中4名患者的皮損活檢，進行病理、免疫組化和電鏡觀察。 (3)用覆蓋全基因組22條常染色體的382個微衛(wèi)星標記對該家系進行全基因組掃描，用MegaBACE-1000DNA分析系統(tǒng)進行微衛(wèi)星標記的分型，linkage軟件對基因分型結果進行兩點參數(shù)連鎖分析，用Cyrillic軟件進行單倍型構建，確定定位區(qū)域的上下界。 結果： (1)該RPAF家系四代，至少包括成員62人(部分家系成員拒絕參與調(diào)查研究)，其中21名患

4、者。我們在給體檢的14名患者中，所有患者均有屈側色素沉著的典型臨床表現(xiàn)，還有一些不典型的臨床表現(xiàn)，例如我們首次發(fā)現(xiàn)一名患者的皮損為單側色素沉著(早期表現(xiàn))、肢端網(wǎng)狀色素沉著癥樣表現(xiàn)、遺傳性對稱性色素異常癥樣表現(xiàn)、泛發(fā)性色素異常癥樣表現(xiàn)。 (2)組織病理顯示表皮角化過度，毛囊角栓多見，表皮突向下延長呈狹窄的枝條狀，粒層增厚，棘層輕度肥厚，棘層中部細胞可見空泡變性，基底層黑素增多，尤以向下延伸的表皮突為甚；真皮淺層可見角囊腫和散在黑

5、素顆粒和噬黑素細胞，小血管周圍輕度單一核細胞浸潤。電鏡下觀察到黑素細胞活躍，可見大量的黑素小體分布于基底層角質(zhì)形成細胞質(zhì)內(nèi)胞。 (3)用Linkage軟件進行兩點連鎖分析。在第1到第16條常染色體和第18到第22條常染色體上沒有發(fā)現(xiàn)與RPAF明顯連鎖的證據(jù)(沒有連鎖值大于3的標記)。因此，排除該病與這21條常染色體連鎖的可能性，首先出現(xiàn)連鎖值(LOD值)值大于3的標記是17號染色體上的D17S831(最大LOD值Zmax=3.6

6、1，重組率θ=0.00)，因此，初步確定了RPAF與17號染色體連鎖。 為了進一步證實和精細定位RPAF，我們從GénéthonHumanLinkageMap數(shù)據(jù)庫內(nèi)挑選了覆蓋D17S938遠端區(qū)域的其他標記進行進一步的基因分型和連鎖分析，結果顯示其中LOD值大于3的有D17S1866(Zmax=3.61，θ=0.00)和D17S1529(Zmax＝3.01，重組率θ=0.00)，充分說明RPAF與17號染色體連鎖。我們通過單倍

7、型分析進一步縮小易感區(qū)域范圍，單倍型分析結果顯示家系中帶有致病基因的染色體在標記D17S1828和D17S1810之間、標記D17S1810和D17S938之間、標記D17S831和D17S1798之間發(fā)生重組，說明D17S1798近端不是RPAF的易感區(qū)域、D17S1798的遠端6.8cM為RPAF的易感區(qū)域。 結論： (1)屈側網(wǎng)狀色素沉著癥的臨床表現(xiàn)復雜，具有多樣臨床色素變化譜。該病具有典型的屈側色素沉著臨床表現(xiàn)的

8、同時，還有一些不典型的臨床表現(xiàn)。我們首次發(fā)現(xiàn)一名患者的皮損為單側色素沉著(早期表現(xiàn))，首次發(fā)現(xiàn)一名患者同時具有肢端網(wǎng)狀色素沉著癥樣表現(xiàn)、遺傳性對稱性色素異常癥樣表現(xiàn)和泛發(fā)性色素異常癥樣表現(xiàn)。 (2)組織病理特征性顯示表皮突向下延長呈狹窄的枝條狀。電鏡下觀察到黑素細胞活躍，可見大量的黑素小體分布于基底層角質(zhì)形成細胞。 (3)我們首次RPAF致病基因定位在17號常染色體短臂17p13.3上D17S1798遠端的區(qū)域內(nèi)。該區(qū)域