清毒飲（片）和養(yǎng)正片聯(lián)合化療治療急性白血病療效及其分子機制的研究.pdf

1、急性白血病(AL)是嚴重危害人類健康和生命的重大疾病。上個世紀70年代以后，隨著化療策略逐漸完善，抗白血病新藥的應用，造血干細胞移植技術的發(fā)展，免疫和基因療法的使用，白血病的治療有了巨大的進步。但是，欲真正明了其病因和發(fā)病機理，探求安全、高效而經濟可行的防治方法，則仍然任重而道遠。從祖國醫(yī)藥寶庫里探求抗AL新藥，仍具有重要的學術價值與經濟價值。據此，我院血證研究室從1991年至今，進行了中醫(yī)藥治療白血病的臨床和實驗研究，本人作為主要研究

2、人員之一，參與其中。在國家中醫(yī)藥管理局和廣東省科委科研基金等的資助下，在自擬抗白血病中藥Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號方治療白血病取得較好療效的基礎上，我們制訂了清毒飲和養(yǎng)正片兩個中藥復方，辨證用于AL化療的不同階段，取得良好效果；我們又進而利用AL動物模型和細胞株，開展了該二方抗AL療效機理的研究，取得了一系列成果。但受限于病床數等原因，既往的觀察病例數偏少；自2002年以后，我們在先前研究的基礎上，為了便于患者服用和攜帶，進一步改良了清毒飲，并將其改

3、為素片，即成為清毒片；并增加了觀察樣本，繼續(xù)與養(yǎng)正片一道辨證應用于化療的不同階段，并取得了較滿意的療效。 研究目的本研究旨在進一步觀察中醫(yī)藥聯(lián)合化療治療人類AL的增效減毒方案，并探討其對人類白血病療效的分子機制，為臨床治療AL提供安全、有效、廉價的更佳方案，并為將來開發(fā)抗AL中藥新藥打下基礎。 研究方法與內容本研究包括文獻研究、臨床研究與實驗研究，在先前系列觀察的基礎上，進一步擴大臨床觀察樣本，以觀察中藥清毒飲(片)和養(yǎng)

4、正片聯(lián)合化療治療AL近、中、遠期增效減毒作用，并直接觀察服用該二方后AL病人體內藥物作用的分子機制。 文獻研究：總結分析了近年來，特別是近5年來國內外AL中西醫(yī)研究領域的一系列進展，并提出存在問題和可能的解決方案。 臨床研究：1994年2月-2005年12月選取137例AL患者，隨機分為中西醫(yī)聯(lián)合治療組和單純化療組。中西醫(yī)聯(lián)合治療組92例，再按中醫(yī)辨證分為兩組，治以辨證分期、序貫服用清毒飲(片)和養(yǎng)正片并聯(lián)合化療；與單純

5、化療組45例作組間和自身前后比較，從臨床療效、提高生存質量、降低癥候積分等進行分析；并比較了清毒片和清毒飲、中西醫(yī)聯(lián)合療法對AL不同亞型的療效差異。實驗研究：選取AL患者作為研究對象，采用自身前后對照，抽取化療前患者用清毒飲和養(yǎng)正片治療前、后的骨髓液，運用免疫細胞化學染色和原位雜交法檢測觀察了中藥對其Bcl-2、P53、Fas及其mRNA表達影響。 研究結果(一)文獻研究AL的現(xiàn)代西醫(yī)治療主要采用化療、造血干細胞移植、基因、免疫

6、療法，取得了巨大的進步；但仍存在復發(fā)率高、多藥耐藥、供體缺乏、治療風險大而安全性低，費用高昂等缺點。國內外中醫(yī)藥抗AL的研究，大多數限于小樣本或短期臨床研究，或為AL動物模型或細胞株實驗研究，與人類AL真實情況存在較大差距，故有必要深入研究。 (二)臨床研究1.中西醫(yī)聯(lián)合組與西醫(yī)治療組治療前病情比較兩組治療前病情大致齊同(P＞0.05)，具可比性。 2.各組間緩解率的比較觀察組二型的CR率均稍高于對照組，但經統(tǒng)計學處理，

7、差異尚無顯著性意義(P值均＞0.05)。提示中西醫(yī)聯(lián)合治療組與單純西醫(yī)治療組的CR率相當。 3.治療后各組間原始細胞減少指數(MBDI)的比較MBDI＞60者觀察組中熱毒熾盛證、氣血兩虛證分別為39例(39/53)和34例(34/39)，合計73例(73/92)，占79.35％；對照組僅為27例(27/45)，占60.00％。即中西醫(yī)聯(lián)合治療組MBDI優(yōu)于單純西醫(yī)治療組，且以氣血兩虛證者更佳，熱毒熾盛證者次之，P＜0.05，提示

8、清毒飲和養(yǎng)正片對化療均有增效作用。 4.治療后各組生存質量、癥候積分經秩和檢驗顯示，熱毒熾盛組與氣血兩虛組比較，差異無顯著性意義(P＞0.05)；熱毒熾盛組、氣血兩虛組分別或合并成中西醫(yī)聯(lián)合組，與西醫(yī)組進行兩兩比較，差異均有顯著性意義，P值均＜0.01。提示清毒飲(片)和養(yǎng)正片對化療有增效減毒作用。 5.清毒片和清毒飲療效的比較經方差分析和t檢驗(雙側)，結果清毒片與清毒飲治療的療效差異無顯著性意義，P＞0.05，提示清

9、毒片與清毒飲的療效相當。 6.清毒飲(片)和養(yǎng)正片對AL各亞型的療效比較經Ridit分析和卡方檢驗顯示，本組各亞型AL病人的療效差別無顯著性意義(P＞0.05)，即尚未能證明該二方對AL某亞型有特異性療效。 (三)實驗研究1.Bcl-2、P53、Fas表達情況經清毒飲和養(yǎng)正片治療后，患者Bcl-2基因下調，F(xiàn)as基因上調，與治療前相比，差異有非常顯著或顯著性意義，P＜0.01或＜0.05；P53基因似略有上調，但差異無顯

10、著性意義，P＞0.05。 2.Bcl-2mRNA、P53mRNA、FasmRNA表達情況經清毒飲和養(yǎng)正片治療后，患者Bcl-2mRNA和P53mRNA表達明顯下降，F(xiàn)asmRNA表達較治療前明顯上升，與治療前比較，差異均有非常顯著性意義，P值均＜0.01。 結論本研究擴大觀察樣本，進一步證明清毒飲和養(yǎng)正片具有抗白血病作用，且主要表現(xiàn)在對化療有減毒增效作用，能提高患者生存質量、降低癥候積分。本研究觀察比較了清毒片與清毒飲的

11、療效差別，結果表明，二者的差異無顯著性意義，提示清毒片與清毒飲的療效相當；即經過改良后的清毒片不但保持了原有的抗白血病療效，而且更便于患者攜帶和服食。 本組各亞型AL病人的療效差別無顯著性意義，尚不能證明清毒飲(片)和養(yǎng)正片對AL某亞型有特異性療效。 本組15例病人Bcl-2及其mRNA高表達，且表達水平越高則療效越差；15例病人P53，F(xiàn)as及其mRNA低表達甚至缺失。經清毒飲和養(yǎng)正片治療后，Bcl-2及其mRNA表達