遠隔缺血訓練促進血管新生及蛋白差異表達的研究.pdf

1、第一部分缺血訓練促進血管新生的遠隔作用 目的：探討骨骼肌缺血訓練促進缺血心肌和骨骼肌血管新生的遠隔作用。 方法：1.對冠狀動脈缺血的影響：取健康成年新西蘭兔，冠狀動脈左室支安置氣囊梗阻器，隨機分為遠隔缺血訓練組(RIT)、單純心肌缺血組(MI)、假手術組(Sham)。RIT和MI組給予4周間斷性心肌缺血刺激，建立可控性心肌缺血模型。RIT組同時應用止血帶環(huán)扎雙下肢，給予每日4次，每次10分鐘骨骼肌缺血訓練。2.對股動脈缺

2、血的影響：健康成年新西蘭兔，左股動脈安置氣囊梗阻器，隨機分為單側遠隔缺血訓練組(uRIT)、下肢缺血組(LI)。兩組均給予間斷性左下肢缺血刺激，建立可控性下肢缺血模型。uRIT組同時應用止血帶環(huán)扎右下肢，給予右側骨骼肌缺血訓練。刺激4周后，股動脈缺血組做左下肢DSA檢測。之后分別取各組缺血區(qū)心肌(冠脈缺血實驗)和左側內收肌(股動脈缺血實驗)觀察形態(tài)學改變；微球技術檢測缺血區(qū)冠狀動脈和股動脈循環(huán)血流量變化；Ⅷ因子免疫組化判斷毛細血管密度；

3、Western blot方法檢測血管內皮生長因子(VEGF)。 結果：與MI組相比，RIT組缺血心肌血流量，毛細血管密度以及VEGF分別增加35％，49％和28％(p<0.01)；局部血流量，毛細血管密度的增加與VEGF的變化呈正相關(r=0.74，0.67，p<0.01)；心肌缺血組側支血流量明顯大于Sham組(p<0.01)。DSA檢測可見，兩組比較，uRIT組股動脈缺血區(qū)側支血管生成顯著；uRIT組血流量明顯增加。

4、 結論：遠隔缺血訓練促進缺血心肌與骨骼肌局部血流量增加和側支循環(huán)生成。 第二部分遠隔缺血訓練促進血管新生的蛋白質組學研究 目的：探索遠隔缺血訓練促進血管新生的缺血心肌差異蛋白表達，為遠隔作用提供蛋白質組學證據和分子生物學基礎。 方法：健康成年新西蘭兔15只,冠狀動脈左室支安置氣囊梗阻器，隨機分為遠隔缺血訓練組(RIT)、單純心肌缺血組(MI)、假手術組(Sham)，每組5只。RIT和MI組給予4周可控性心肌缺血刺

5、激，RIT組同時給予遠隔缺血訓練。應用雙向凝膠電泳分離三組缺血心肌細胞蛋白質，經圖像分析發(fā)現差異點后，運用質譜分析技術鑒定差異蛋白質。 結果：與MI相比，圖像分析發(fā)現遠隔缺血訓練后，RIT組差異表達的蛋白點共38個，其中5個差異點同時出現在MI與Sham的比較中。應用質譜分析鑒定出其中的33個蛋白點，數據庫查詢后最終確定蛋白質22種，按照功能分別屬于以下四類：(i)與線粒體和能量代謝相關蛋白(13種)；(ii)細胞骨架蛋白(2種