外源性p53基因聯(lián)合不同時限放療對肺腺癌細胞A549作用的實驗研究.pdf

1、肺癌主要分為兩類:小細胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)和非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),其中后者占據(jù)全部肺癌的80％,可進一步分類為腺癌(25％)、鱗癌(35％)、大細胞未分化癌(15％)和其他不常出現(xiàn)的亞型。雖然外科治療被認定為大部分非小細胞肺癌的首選方法,但約有80％的肺癌患者在確診時已為局部晚期或晚期,從而失去了根治性手術治療機會。而放射治療則成為該

2、期患者重要的局部治療手段。放射敏感性是放射治療成敗的關鍵,采用各種藥物和生物學的手段增加腫瘤的放射敏感性是提高放療療效的重要方法。
　　 近年來,隨著腫瘤分子生物學的發(fā)展,應用基因藥物提高腫瘤放射敏感性受到廣大臨床研究者的關注。目前研究發(fā)現(xiàn)與放射敏感性相關基因很多,女ras,Rb,p53等,而p53基因作為目前研究最透徹,也是功能最強大的抑癌基因,存在于人體正常細胞,該基因突變與人類腫瘤的發(fā)生及放療敏感性密切相關。隨著目前對p5

3、3基因研究的深入,該基因在臨床治療中增加放療敏感性的作用不容小覷,并已廣泛應用。
　　 目的：
　　 臨床工作中將由腺病毒載體所攜帶的野生型p53基因導入腫瘤中,同時聯(lián)合放療,以期獲得最大的臨床收益。但放療對p53基因的蛋白表達及細胞殺傷作用有一定影響,對于用藥后的最佳放療時間安排目前尚定論,亟待研究。該研究旨在探討重組人腺病毒p53導入后不同時限放療對A549肺腺癌細胞p53蛋白表達和細胞殺傷作用的影響。
　　

4、 方法：
　　 將重組人腺病毒所攜帶的野生型p53注射劑加入已被證實部分存在p53基因缺失的人肺腺癌細胞株A549中,加藥后不同時間聯(lián)合射線照射(單次4Gy),通過MTT檢測細胞生長抑制,流式細胞儀檢測細胞凋亡以及western blot檢測野生型p53蛋白的表達情況。
　　 結果：
　　 腺病毒p53加入6h、24h和48h后放療組對細胞生長的抑制作用顯著高于單純加藥組、加藥即刻放療組和加藥3h后放療組,P<0

5、.05。隨著加藥與放療間隔的延長,細胞凋亡率也逐漸升高,加藥即刻放療組的細胞凋亡率最小。加藥即刻放療組、加藥3小時后放療組其野生型p53蛋白表達明顯弱于6h、24h和48h后放療組(P<0.05)。盡管加藥后48h野生型p53蛋白表達最高,但與加藥6h和24h后放療組相比差異無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
　　 結論：
　　 放療聯(lián)合腺病毒p53導入肺腺癌細胞所產生的最大殺傷作用可以選定在導入腺病毒p53基因后6h～48