尤瑞克林開放急性腦缺血再灌注大鼠側(cè)枝循環(huán)的作用及機制研究.pdf

1、[目的]通過檢測不同劑量尤瑞克林對急性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能、血管新生等作用的影響，探討尤瑞克林開放急性腦缺血再灌注大鼠側(cè)枝循環(huán)的作用及機制，為臨床HUK的使用提供更深層次的理論依據(jù)。
　　[方法]使用經(jīng)改良過的栓線法建立 SD大鼠右側(cè)大腦中動脈閉塞模型（MCAO），缺血2h時行神經(jīng)功能缺損評分并拔栓模擬再灌注（I/R）。將制作成功SD大鼠模型隨機分為5組，即假手術+生理鹽水組，I/R+生理鹽水組，I/R+HUK高（17.5×1

2、0-3PNAU/kg）、中(8.75×10-3PNAU/kg)、低劑量(3.5×10-3PNAU/kg)組，術后30分鐘首次給予尤瑞克林或生理鹽水尾靜脈注射，以后定時每日注射1次，連續(xù)注射7天。大鼠進行神經(jīng)功能缺損評分后處死，運用實時定量RT-PCR法檢測腦梗塞灶邊緣區(qū)域B1R、B2R的mRNA表達水平；Western blot蛋白免疫印跡法檢測梗塞交界區(qū)PI3K/eNOS、Ang-1/Tie-2，VEGF/VEGFR-2的表達水平；v

3、WF因子免疫熒光法（FITC）測定梗塞邊界區(qū)域微血管生長密度。
　　[結(jié)果]與I/R+NS組比較（1）低、中、高劑量HUK治療組7d時Longa評分較造模后2h時明顯降低（P<0.05）；7d時HUK中、高劑量組才顯著降低神經(jīng)功能缺損癥狀，且中、高劑量治療作用無明顯差別；（2）RT-PCR法提示HUK低、中、高劑量治療組B1R、B2R的mRNA表達水平均顯著上調(diào)（P<0.05），且與劑量呈正相關，但小、中劑量治療作用無差異；（3）

4、Western Blot法示HUK低、中、高劑量治療組PI3K-110α、eNOS、Ang-1蛋白表達均明顯增加（P<0.05），各組隨劑量增加，蛋白表達顯著增強，但小、中劑量治療作用無差異；HUK中、高劑量治療組Tie-2蛋白表達均顯著上升（P<0.05）,且與劑量呈正相關，小劑量組與I/R+NS組作用無差異；HUK高劑量治療組VEGF蛋白表達明顯升高（P<0.05）,小、中劑量組與I/R+NS組治療作用無差異；HUK中、高劑量治療組

5、VEGFR-2蛋白表達顯著增加（P<0.05）,且與治療劑量呈明顯正相關，但小劑量組與I/R+NS組治療作用無區(qū)別；（4）免疫熒光法提示HUK低、中、高劑量治療組以vWF-FITC為標記的微血管密度(MVD)顯著增加（P<0.05），隨著HUK劑量增加，MVD增加，但小、中劑量治療作用無差異。
　　[結(jié)論]HUK通過上調(diào)PI3K/eNOS、Ang-1/Tie-2，VEGF/VEGFR-2等血管新生相關因子的表達，發(fā)揮開放大鼠腦缺血