MAPK和ROS在慢性飲酒大鼠胃黏膜細(xì)胞增殖中作用的研究.pdf

1、以往的研究證實，慢性飲酒可使胃黏膜細(xì)胞更新加快，引起胃黏膜適應(yīng)性細(xì)胞保護(hù)作用，但其機(jī)制尚不清楚。本研究在以往建立的慢性飲酒動物模型的基礎(chǔ)上，探討長期攝入低濃度酒精和胃黏膜細(xì)胞增殖之間的相關(guān)性以及與此相關(guān)的分子事件，尤其關(guān)注活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)及細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellularsignal-regulatedkinases，ERKs)、大分子MAPK(bigmitogen-activa

2、tedproteinkinases-1，BMKl)和c-Jun氨基末端激酶(c-JunN-terminalkinase，JNK)信號通路是否參與了慢性飲酒引起的大鼠胃黏膜細(xì)胞增殖過程。將成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為四組，第一組(對照組)：飲用清水；第二組(酒精組)：飲用6﹪(v/v)酒精水溶液；第三組(槲皮素組)：飲用清水，槲皮素(100mg/kg)每12h灌胃一次；第四組(酒精+槲皮素組)：飲用6﹪酒精水溶液，同時每隔12h給予槲皮素(1

3、00mg/kg)灌胃一次，均處理7天。在處理7天末，取大鼠胃黏膜，用流式細(xì)胞術(shù)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的免疫組化染色以及PCNA和細(xì)胞周期蛋白D1(CyclinD1)的免疫印跡分析觀察胃黏膜的細(xì)胞增殖情況，同時用免疫印跡法檢測胃組織中ERKs、BMK1和JNK激酶的下游分子c-Jun的表達(dá)及活性的改變，采用免疫熒光雙重染色方法對胃黏膜組織石蠟切片PCNA和磷酸化的BMK1(p-BMK1)蛋白進(jìn)行定位。結(jié)果表明：與對照組相比，飲用低濃

4、度酒精后細(xì)胞增殖明顯增強(qiáng)；酒精組PCNA、p-BMK1雙陽性細(xì)胞主要定位于胃底腺頸部；BMK1的表達(dá)、激活以及c-Jun的活性與酒精誘導(dǎo)的胃黏膜干細(xì)胞增殖呈正相關(guān)，ERK1/2的表達(dá)、激活與增殖無關(guān)；但飲酒同時給予自由基清除劑……槲皮素灌胃抑制了酒精誘導(dǎo)的BMK1表達(dá)與激活以及c-Jun的活化，同時反轉(zhuǎn)了慢性飲酒引起的細(xì)胞增殖增強(qiáng)的作用。這些結(jié)果說明慢性飲用低濃度酒精刺激了胃黏膜底腺干細(xì)胞的增殖，可能與酒精引起ROS增多有關(guān)，同時本研究