兔角膜緣上皮細(xì)胞培養(yǎng)聯(lián)合羊膜行自體移植的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁
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1、目的:研究運(yùn)用體外培養(yǎng)的角膜緣干細(xì)胞聯(lián)合人羊膜的方法,行自體移植治療角膜緣干細(xì)胞完全缺乏的兔眼.方法:選用健康新西蘭白兔20只,顯微鏡下手術(shù)制成右眼角膜緣干細(xì)胞缺乏的兔眼模型,其中12只兔左眼取少量的角膜緣組織進(jìn)行體外培養(yǎng)、擴(kuò)增一周左右,然后傳代并種植于無上皮的人羊膜上,繼續(xù)培養(yǎng)約20天左右制成人工合成角膜上皮移植片,采用自體移植的方法,移植到相應(yīng)的12只角膜緣干細(xì)胞完全缺乏的兔眼模型上,另外8只兔只進(jìn)行無上皮細(xì)胞羊膜的移植.結(jié)果:移植

2、了含有自體角膜上皮細(xì)胞的羊膜的兔眼,術(shù)后早期都形成了角膜上皮化并明顯抑制了新生血管的再生,通過角膜熒光素染色、蘇木素-伊紅(HE)染色、細(xì)胞角蛋白AE1單克隆抗體免疫組化以及掃描電鏡和透射電鏡觀察,證明培養(yǎng)并移植的角膜上皮與正常的角膜上皮無明顯差異;而只接受羊膜移植的兔子,術(shù)后患眼又出現(xiàn)角膜混濁和明顯的新生血管,角膜HE染色示復(fù)層上皮細(xì)胞,排列不規(guī)則,夾雜空泡樣杯狀細(xì)胞,其下基質(zhì)可見炎性細(xì)胞、紅細(xì)胞和新生血管,表明角膜表面有結(jié)膜上皮覆蓋

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