氟苯尼考殘留酶免疫法的研究.pdf

1、氟苯尼考殘留于動物源性食品中，會對人的身體健康造成危害，國家明確規(guī)定了氟苯尼考的殘留限量。目前氟苯尼考殘留的檢測技術，大多使用LC-MS、HPLC等方法分析檢測，這些方法有一定的優(yōu)點，比如假陽性率低，檢測準確，但同樣具有不可忽視的缺點，如樣品前處理程序復雜，儀器昂貴，用時長，無法大批量檢測，需要專業(yè)人員來操作，面對獸藥使用量越來越大，獸藥殘留現(xiàn)象越來越嚴重的現(xiàn)狀，這些缺點直接制約了FFC殘留的現(xiàn)場快速檢測，使得食品安全行政執(zhí)法人員無法對

2、FFC進行有效的監(jiān)督以及監(jiān)測。本研究旨在建立了動物源性FFC殘留快速檢測的酶免疫方法,以達到通過酶免疫法快速準確定量測定 FFC殘留。
　　本研究首先通過混合酸酐法制備了FFC的完全抗原，通過紫外分光光度法以及紅外光譜的鑒定，證明完全抗原合成成功。選用新西蘭大白兔作為免疫動物，經(jīng)過5次免疫，獲得高效價血清，通過proteinA-sepharuse親和層析法純化血清，經(jīng)過SDS-PAGE驗證，抗體制備成功。其次建立了IC-ELISA

3、法，經(jīng)過對多個實驗條件的優(yōu)化，建立完整的IC-ELISA檢測法。根據(jù)標準曲線的線性方程為y=-0.19943+1.2313,由此推出其 IC50值為4.5μg/mL，檢測限為0.53ng/mL。再次建立了BA-ELISA法，通過對實驗條件的優(yōu)化，建立了完整的 BA-ELISA法，線性方程為y=-0.32216+1.5559，IC50值為1.9μg/mg。檢測限為0.15ng/mg，兩種方法均對FFC的結構類似物氯霉素有交叉反應，對其他的