口服治療劑量氟苯尼考對仔豬造血免疫器官的毒副作用研究.pdf

1、酰胺醇類抗生素（Amphenicols）到目前為止已有三代藥物上市，分別為氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考。其中，作為第一代的氯霉素具有再生障礙性貧血、免疫抑制、消化功能紊亂及過敏反應(yīng)等諸多毒副作用和不良反應(yīng)，已被禁用于獸醫(yī)臨床;甲砜霉素也能抑制機(jī)體的造血功能，且其免疫抑制作用達(dá)氯霉素的5倍之多，其用量正逐漸減少;氟苯尼考作為第三代動物專用的酰胺醇類抗生素，不會引起機(jī)體的再生障礙性貧血，且具有抗菌譜廣、用量低、細(xì)菌耐藥性低及毒性小等優(yōu)點(diǎn)，自上

2、世紀(jì)80年代末被研制成功以來，已被廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)實(shí)踐，為預(yù)防和控制動物疾病做出了重要貢獻(xiàn)。但是，隨著該藥在生產(chǎn)中的廣泛應(yīng)用，其毒副作用也被逐漸發(fā)現(xiàn)，已有眾多學(xué)者報(bào)道中高劑量氟苯尼考在魚、蝦、蟹、馬、牛、豬、雞等動物上應(yīng)用后會引發(fā)動物的造血及免疫抑制反應(yīng)。本研究通過對斷奶且進(jìn)行了豬瘟疫苗免疫的仔豬飼喂10天含常規(guī)治療劑量氟苯尼考的飼料，模擬實(shí)際生產(chǎn)中為防控仔豬疫病而服用氟苯尼考的過程，通過階段性的采血測定血常規(guī)指標(biāo)、血清豬瘟抗體水平及血清

3、中IL-6及Hsp70的濃度，并剖殺部分試驗(yàn)組和對照組仔豬，取其骨髓、胸腺及脾臟組織進(jìn)行Hsp70濃度檢測，bcl-2和p53基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平的檢測，并通過病理組織學(xué)觀察比較兩組仔豬在造血免疫器官的損傷、Hsp70定位表達(dá)及細(xì)胞凋亡情況方面的差別，以期探討常規(guī)治療劑量的氟苯尼考在仔豬應(yīng)用后是否會引發(fā)仔豬的造血功能異常及免疫抑制，并進(jìn)一步研究毒性作用發(fā)生的初步機(jī)制，以便指導(dǎo)生產(chǎn)中對氟苯尼考的合理使用，使其能夠更安全、更高效地服務(wù)于畜牧

4、生產(chǎn)。
　　試驗(yàn)結(jié)果表明，按常規(guī)治療劑量給仔豬拌料口服氟苯尼考10天后，雖未發(fā)現(xiàn)較為嚴(yán)重的造血免疫器官的損害，但試驗(yàn)組仔豬的諸多血液、免疫指標(biāo)與對照組相比均發(fā)生了一定程度的變化。
　　仔豬在口服常規(guī)治療劑量氟苯尼考后，紅細(xì)胞總數(shù)降低、紅細(xì)胞體積及血小板體積增大，血小板總數(shù)與對照組相比發(fā)生了極顯著下降(p＜0.01);通過病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組仔豬骨髓中的巨核細(xì)胞發(fā)生一定程度的凋亡，致使血小板的生成量減少;試驗(yàn)組仔豬的血清

5、IL-6濃度顯著高于對照組(p＜0.05)，由于IL-6與IL-3能協(xié)同夠刺激骨髓細(xì)胞的增殖，因此IL-6濃度的升高可能是機(jī)體對骨髓組織損傷的生理性調(diào)節(jié)反應(yīng)。
　　試驗(yàn)組仔豬的血液淋巴細(xì)胞數(shù)量在投藥后顯著下降(p＜0.05)、粒細(xì)胞數(shù)量和豬瘟抗體水平低于對照組，組間差異不顯著(p＞0.05);病理組織學(xué)檢查表明，試驗(yàn)組仔豬的骨髓、胸腺及脾臟的發(fā)育均受到了一定程度的抑制，骨髓造血細(xì)胞系發(fā)生萎縮，骨髓組織中脂肪細(xì)胞的數(shù)量明顯增多，胸腺

6、及脾臟白髓區(qū)淋巴細(xì)胞的數(shù)量減少、排列疏松，機(jī)體對豬瘟疫苗的免疫應(yīng)答反應(yīng)能力降低，特異性豬瘟抗體水平下降。
　　試驗(yàn)組仔豬血清及骨髓Hsp70的濃度均有所升高，當(dāng)細(xì)胞損傷或受到不良因素的刺激時(shí)Hsp70會過表達(dá)，因此，Hsp70濃度的升高表明血液和骨髓細(xì)胞發(fā)生了損傷或受到了氟苯尼考的不良刺激;bcl-2和p53 mRNA的熒光定量檢測結(jié)果表明，試驗(yàn)組仔豬的骨髓、胸腺及脾臟組織bcl-2的表達(dá)量與對照組相比均有一定程度的上調(diào)，而p53

7、的轉(zhuǎn)錄水平有一定的下調(diào)，可能與氟苯尼考能刺激造血免疫器官實(shí)質(zhì)細(xì)胞的凋亡，機(jī)體針對這種異常的凋亡過程發(fā)生了應(yīng)答反應(yīng)有關(guān)。通過對免疫器官組織的原位末端標(biāo)記(TUNEL)檢測發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組與對照組間細(xì)胞凋亡存在差異，試驗(yàn)組骨髓的部分巨核細(xì)胞及胸腺皮髓交界處毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞可見陽性信號。
　　總之，常規(guī)治療劑量的氟苯尼考會對仔豬的造血免疫器官產(chǎn)生一定的暫時(shí)性毒副作用，但這種毒副作用是可逆的，隨停藥時(shí)間的延長而逐漸減弱，提示生產(chǎn)中應(yīng)用該藥時(shí)