炎癥反應(yīng)在難治性癲癇作用機制中的初步研究.pdf

1、第一部分血清炎癥標志物在難治性癲癇患者中的變化規(guī)律
　　目的：大量的研究證據(jù)表明炎癥與癲癇密切相關(guān)，但是國內(nèi)外對于藥物難治性癲癇患者系統(tǒng)性炎癥的研究較少，本課題旨在研究血清炎癥標志物在難治性癲癇患者中的水平變化以及變化的規(guī)律。
　　方法：共四組，難治性癲癇組、急性缺血性卒中組（包括腦梗死和短暫性腦缺血發(fā)作）、非難治性癲癇組和健康對照組；分別予以難治性癲癇組與急性缺血性腦血管病組兩組比較，難治性癲癇組與非難治性癲癇組和健康對照

2、組三組比較。詳細記錄患者年齡、性別、病史、癲癇病程和發(fā)作頻率等臨床資料。實驗室檢測所有患者及健康對照空腹血血清超敏C反應(yīng)蛋白(high sensitive C-reactive protein, hs-CRP)、紅細胞沉降率（Erythrocyte sedimentation rate，ESR）、纖維蛋白原(fibrinogen，F(xiàn)ib)、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholestorol, LD

3、L-C）、甘油三脂、血糖、尿酸水平；血常規(guī)白細胞計數(shù)（white blood cell count，WBC）、淋巴細胞計數(shù)、血紅蛋白水平(hemoglobin, Hb)和紅細胞比容（hematocrit，HCT）。對難治性癲癇組患者進行規(guī)范的術(shù)前評估：分析癥狀學(xué)、視頻腦電圖、MRI、皮層腦電圖和PET-CT，對有手術(shù)適應(yīng)癥的患者給予致癇灶切除的外科治療。
　　結(jié)果：血清hs-CRP的研究結(jié)果：難治性癲癇患者病例數(shù)共86例，癲癇患病

4、病程1.10~33.00年（10.54±9.61），發(fā)作頻率0.30~12.00次/月（3.25±6.24）。急性缺血性卒中組患者共50例，急性缺血性卒中組和難治性癲癇組男女性別比率無顯著差異（P>0.05）；但年齡比較有顯著性差異（P<0.05）；兩組hs-CRP水平比較無顯著差異（P>0.05）。非難治性癲癇患者45例，健康對照組30例，難治性癲癇與非難治性癲癇、健康對照組三組比較，男女性別比率無顯著差異（P>0.05）；三組年齡無

5、顯著差異（P>0.05）；難治性癲癇與非難治性癲癇、健康對照組三組hs-CRP水平比較，難治性癲癇組hs-CRP水平高于非難治性癲癇組、健康對照組（P<0.05），非難治性癲癇組hs-CRP水平高于健康對照組，但是無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。難治性癲癇組與急性缺血性卒中組、非難治性癲癇組和健康對照組血清hs-CRP水平異常（hs-CRP>3mg/L）比率依次為17.61％,14.00%,6.67%和5.56%；盡管難治性癲癇組血清hs

6、-CRP異常比率最高，但與另外三組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。單因素直線回歸分析相關(guān)因素與難治性癲癇患者血清 hs-CRP的關(guān)系，結(jié)果提示癲癇病程、癲癇發(fā)作頻率、ESR與難治性癲癇患者血清hs-CRP水平存在顯著相關(guān)（P<0.05）；患者年齡、Fib、LDL-C、甘油三酯、血糖和尿酸與難治性癲癇患者hs-CRP水平無顯著相關(guān)（P>0.05）。多元線性回歸分析癲癇患者（包括難治性和非難治性癲癇癲癇患者）多變量與血清 hs-CR

7、P的相關(guān)性，癲癇患者血清hs-CRP與癲癇發(fā)作頻率、血清ESR顯著相關(guān)，（P<0.05）；血清 hs-CRP與抗癲癇藥物無顯著相關(guān)（P>0.05）。
　　其他相關(guān)的血清炎癥生物學(xué)指標在難治性癲癇患者中的變化規(guī)律：難治性癲癇患者組與急性缺血性卒中組比較，難治性癲癇患者組ESR顯著高于急性缺血性卒中患者組，LDL-C顯著低于急性缺血性卒中患者組（P<0.05），兩組Fib、WBC、淋巴細胞、Hb、HCT比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.0

8、5）；難治性癲癇患者與非難治性癲癇患者、健康對照組比較，難治性癲癇患者ESR、Fib、WBC水平顯著高于非難治性癲癇患者、健康對照組（P<0.05），三組LDL-C、淋巴細胞、Hb、HCT水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。難治性癲癇患者LDL-C、ESR、WBC、淋巴細胞計數(shù)、Hb、HCT、Fib水平與難治性癲癇病程、癲癇發(fā)作頻率的直線回歸分析，結(jié)果提示LDL-C、ESR、Fib與癲癇病程顯著相關(guān)（P<0.05）；Fib、ES

9、R、Hb和HCT與癲癇發(fā)作頻率顯著相關(guān)，其中Hb、HCT與癲癇發(fā)作頻率呈負相關(guān)（P<0.05）。
　　難治性癲癇組經(jīng)手術(shù)治療的患者術(shù)前與術(shù)后血清炎癥標志物水平的比較：難治性癲癇手術(shù)組患者（24例）術(shù)后隨訪療效較好，發(fā)作率明顯減少，且無明顯并發(fā)癥和神經(jīng)功能損害。比較患者術(shù)前與術(shù)后血清hs-CRP、LDL-C、ESR、WBC、淋巴細胞計數(shù)、Hb、HCT、Fib水平的變化。結(jié)果顯示難治性癲癇患者術(shù)后血清hs-CRP、ESR、WBC水平較

10、術(shù)前顯著降低（P<0.05）；而術(shù)后LDL-C、Fib、淋巴細胞計數(shù)、Hb、HCT水平較術(shù)前無顯著變化（P>0.05）。
　　結(jié)論：難治性癲癇患者血清hs-CRP、ESR、Fib和WBC水平明顯升高，且可能與癲癇病程和癲癇發(fā)作頻率顯著相關(guān)，手術(shù)治療的患者術(shù)后hs-CRP、ESR、WBC水平較術(shù)前顯著降低。血清炎癥標志物與難治性癲癇兩者是否互為因果有待進一步研究。
　　第二部分 難治性癲癇腦組織IL-6和LC-3表達變化的初步

11、研究
　　目的：本研究旨在初步觀察難治性癲癇患者腦組織中炎癥因子白介素6（interleukin-6，IL-6）與患者腦內(nèi)自噬生物標志物微管相關(guān)蛋白1輕鏈3（microtubule-associated protein1 light chain3，LC-3）的水平變化。
　　方法：實驗組納入16例難治性癲癇患者，診斷符合2010年國際抗癲癇聯(lián)盟新認定的難治性癲癇標準，即正確使用兩種可耐受的抗癲癇藥物經(jīng)足夠的療程及劑量的單藥或

12、聯(lián)合治療仍未能達到無發(fā)作的癲癇，接受癲癇手術(shù)治療行致癇灶切除術(shù)。對照組5例均來自我院急診神經(jīng)外科因頭顱外傷行手術(shù)減壓或清創(chuàng)術(shù)的患者。獲得患者腦組織標本，常規(guī)病理學(xué)HE染色，Western blot和免疫組化檢測腦組織炎癥因子IL-6和自噬標志物L(fēng)C-3的水平變化情況。
　　結(jié)果：實驗組難治性癲癇16例患者包括8例腦外傷后癲癇(Post traumatic epilepsy, PTE),6例顳葉內(nèi)側(cè)癲癇(Mesial tempora

13、l lobe epilepsy, MTLE)伴海馬硬化,2例結(jié)節(jié)性硬化(Tuberous sclerosis complex, TSC)。普通HE染色提示PTE、MTLE與TSC患者致癇灶腦組織內(nèi)神經(jīng)元喪失、膠質(zhì)細胞明顯增生。Western blot和免疫組化檢測IL-6和LC-3在PTE、MTLE組顯著高于對照組(P<0.05)，而PTE、MTLE兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。2例TSC患者中免疫組化顯示IL-6表達不明顯