EGCG作為一種有效的STAT3信號(hào)傳導(dǎo)通路抑制劑的研究.pdf

1、EGCG作為一種有效的作為一種有效的STAT3信號(hào)傳導(dǎo)通信號(hào)傳導(dǎo)通路抑制劑的研究路抑制劑的研究EGCGaneffectiveantagonistofSTAT3signalingpathway學(xué)科專業(yè)：微生物與生化藥學(xué)研究生：嚴(yán)爾福指導(dǎo)教師：周立軍副教授天津大學(xué)藥學(xué)院二零一三年六月3摘要原發(fā)性肝癌是幾種最為常見的惡性腫瘤之一，其患者有較低的生存率。信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)是一種新被發(fā)現(xiàn)的致癌基因，它能夠促進(jìn)肝癌細(xì)胞的生長，繁殖

2、，死亡和進(jìn)展。在本研究中，我們從多種角度探究了表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)作為一種潛在的STAT3抑制劑的應(yīng)用和相關(guān)機(jī)理。此前的一些研究也已表明EGCG是一種廣譜的抗癌化合物。有相關(guān)報(bào)道其能夠阻滯幾種細(xì)胞因子的活化，從而阻斷多種下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路如STAT3JAK信號(hào)通路。當(dāng)應(yīng)用藥物干預(yù)BEL7402和QGY7701細(xì)胞模型后，我們應(yīng)用MTT體外實(shí)驗(yàn)證明了EGCG能夠強(qiáng)烈的抑制這兩種細(xì)胞系的增值和遷移。EGCG能夠誘導(dǎo)體外肝癌細(xì)胞

3、呈現(xiàn)一個(gè)很明顯的濃度依賴性抑制效果。兩者的半數(shù)抑制劑濃度(IC50)分別為：BEL7402細(xì)胞系大約為55μM，QGY7704細(xì)胞系大約為35μM。我們還應(yīng)用流式細(xì)胞儀技術(shù)證明了EGCG能夠通過干預(yù)STAT3信號(hào)通路誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞發(fā)生凋亡。用20μM40μM80μM160μM干預(yù)BEL7402細(xì)胞24小時(shí)后凋亡率分別為4.4%6.7%8.5%和35.6%。相同的條件下，QGY7704細(xì)胞24小時(shí)后凋亡率分別為9.1%15.3%22.7%和

4、50.6%(P0.05)。這些結(jié)果證明了QGY7704對(duì)于EGCG的干預(yù)作用相比于BEL7402細(xì)胞更為敏感。同時(shí)，EGCG能夠明顯降低磷酸化STAT3的表達(dá)量，但是對(duì)于總STAT3表達(dá)量影響不是很明顯。RTPCR的結(jié)果證明EGCG能夠下調(diào)STAT3調(diào)控基因表達(dá)，從而有效抑制肝癌細(xì)胞遷移，入侵和增值。再者，我們應(yīng)用分子對(duì)接的方式闡釋了STAT3和EGCG的相互作用。EGCG中的C=O作為氫的受體同時(shí)與GLU612中的NH以及SER613

5、中的OH形成氫鍵，這種結(jié)構(gòu)也形成了較為牢固的相互作用；EGCG中的一個(gè)芳環(huán)上的氫與STAT3中ARG609中的一個(gè)HH2還形成一般的氫鍵。除此之外，EGCG的其余部分主要以范德華力與STAT3的疏水袋（LYS591、GLU594、ARG609、SER611、GLU612、SER613、THR620、VAL637、GLU638、PRO639）產(chǎn)生相互作用。這些結(jié)果和PTPCR的結(jié)果一樣，證明了EGCG能夠從分子水平上阻滯STAT3活化?？?/p>