微囊化PC12細胞移植對慢性神經源性疼痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用及其機制研究.pdf

1、中山大學博士學位論文微囊化PC12細胞移植對慢性神經源性疼痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用及其機制研究姓名：伍少玲申請學位級別：博士專業(yè)：康復醫(yī)學與理療學指導教師：燕鐵斌20090520微囊化PCI2細胞移植對慢性神經源性疼痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用及其機制研究2探討微囊化對PCI2細胞分泌的影響。3探討微囊化PCI2細胞移植入慢性神經源性疼痛模型大鼠蛛網膜卜腔后的鎮(zhèn)痛效果及其機制。4探討移植后的微囊化PCI2細胞的致瘤性。方法1PCI2細胞的傳代培養(yǎng)及基礎分泌

2、功能的檢測PCI2細胞在DMEM(PH74，高糖)15％胎牛血清中，按l：2傳代培養(yǎng)。每個培養(yǎng)皿約含25106個細胞，收集培養(yǎng)液，采用高效液相色譜一電化學檢測法檢測去甲腎上腺素(NE)的濃度；采用放射免疫法檢測甲硫氨酸腦啡肽(MEK)的濃度。2PCI2細胞PENK基因的表達采用RTPCR方法檢測PCI2細胞PENKmRNA的表達情況。3微囊化PCI2細胞的制作及分泌情況檢測采用海藻酸鈉、多聚賴氨酸和海藻酸鈉制作APA微囊，并包裹PCI2

3、細胞。微囊化PCI2細胞在上述培養(yǎng)液中生長，并采用相同方法檢測培養(yǎng)液中NE和MEK的濃度。4疼痛模型大鼠制作與蛛網膜F腔微創(chuàng)置管采用Kim模型(L5神經結扎)制作慢性神經源性疼痛模型大鼠；同時，采用PE50導管插入大鼠的蛛網膜I卜腔并留置和固定。5實驗分組及干預采用機械性痛覺過敏試驗和斜板試驗篩選符合條件的疼痛大鼠。將符合條件的大鼠隨機分成三組，微囊化PCI2細胞組(APA—PCI2組，n16只)、裸PCI2細胞組(n=15只)和空微囊