E-鈣粘素及P13K信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在腫瘤多細胞耐藥中作用機制的研究.pdf

1、目的:該實驗旨在通過對肺腺癌A549細胞進行平面及立體培養(yǎng),探討其在耐藥性方面的差異及產(chǎn)生差異的可能機制,闡明E-鈣粘素及相關(guān)的PI3K信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在多細胞耐藥中的調(diào)節(jié)作用.方法:該研究以肺腺癌A549細胞為研究對象,在體外進行平面及立體培養(yǎng).分兩部分進行了研究:1)采用旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶及水平恒溫振蕩的方法建立體外三維立體細胞膜型,并通過倒置顯微鏡、掃描電鏡等方法證實三維立體細胞模型的成功建立.采用蛋白印跡、流式細胞、免疫組化、MTT等技術(shù)方

2、法,比較平面培養(yǎng)及立體培養(yǎng)細胞在E-鈣粘素的表達、細胞毒性藥物(ADM)敏感性、細胞周期、細胞凋亡及相關(guān)蛋白(p27、Bcl-x1、Bad)表達的差異;其次在給予E-鈣粘素拮抗劑SHE78-7后,再次比較平面培養(yǎng)及立體培養(yǎng)細胞在細胞毒性藥物(ADM)敏感懷、細胞周期、細胞凋亡及相關(guān)蛋白(P27、Bcl-x1、Bad表達的差異.2)采用蛋白印跡、流式細胞、免疫組化、MTT等技術(shù)方法,①比較平面及立體培養(yǎng)細胞PI3K信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)蛋白(P