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文檔簡介
1、目的:研究高氧對A549細胞Nrf2及其相關抗氧化酶HO-1和Gpx2表達的影響,探討Nrf2在高氧肺損傷中的作用及機制。
方法:A549細胞體外培養(yǎng),并隨機分為空氣組和高氧組,兩組分別暴露于空氣和95%的氧氣中,分別于暴露0h,0.5h,6h,12h后在倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)及形態(tài)學變化;CCK-8法檢測細胞活性;2',7'-二氯二氫熒光素二乙酯(DCFH-DA)染色流式細胞儀檢測細胞內ROS水平;并通過實時熒光定
2、量PCR測定A549細胞Nrf2、HO-1和Gpx2mRNA的表達。
結果:(1)與空氣組比較,高氧暴露后A549細胞生長狀態(tài)明顯不良,懸浮細胞增多,細胞活性下降;(2)與空氣組比較,高氧暴露0.5h后A549細胞內ROS生成明顯增加;(3)與空氣組比較,高氧暴露0.5h和6h后A549細胞Nrf2mRNA表達增加,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);(4)與空氣組比較,高氧暴露0.5h后A549細胞HO-1mRNA表達無明顯變
3、化,差異無統(tǒng)計學意義,高氧暴露6h后HO-1mRNA表達顯著增強,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);(5)與空氣組比較,高氧暴露0.5h和6h后A549細胞Gpx2mRNA表達增加,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
結論:高氧暴露導致A549細胞生長不良、活性進行性下降,同時細胞內ROS生成明顯增加;高氧暴露可上調A549細胞Nrf2及其相關抗氧化酶HO-1和Gpx2mRNA的表達,提示內源性的Nrf2及其相關抗氧化酶HO-
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