測定人血清載脂蛋白M雙抗體夾心ELISA法的建立及其在2型糖尿病中的應(yīng)用.pdf

1、目的：
　　 1建立一種檢測人血清載脂蛋白M(apolipoprotein M，apoM)的雙抗體夾心ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)法。運(yùn)用該方法檢測健康人群血清apoM濃度，并建立apoM的正常參考值范圍。
　　 2.應(yīng)用該方法檢測2型糖尿病患者血清apoM濃度，初步探討apoM在2型糖尿病患者血清中的變化趨勢，以便進(jìn)一步了解apoM對2型糖尿病并發(fā)動脈粥樣硬化相關(guān)疾病

2、的作用。
　　 方法：
　　 1.用抗apoM單克隆抗體作包被抗體，辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase，HRP)標(biāo)記的抗apo M單克隆抗體作酶標(biāo)記抗體，建立檢測apoM的雙抗體夾心ELISA法，并通過一系列方法學(xué)試驗對該方法進(jìn)行評價。
　　 2.測定483例健康人群血清apoM濃度，建立apoM的正常參考值范圍。
　　 3.用該方法檢測117例2型糖尿病患者和111例對照組血清

3、apoM濃度，比較兩組血清apoM、超敏C反應(yīng)蛋(high sensitivity C reactiveprotein，hs-CRP)、血脂水平，分析兩組血清apoM水平和各項指標(biāo)的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：
　　 1.本ELISA法檢測人血清apoM的線性范圍為31.25ng/mL～500ng/mL；最低檢測限為23.92ng/mL；脂蛋白(a)(Lp(a))、載脂蛋白A1(apolipoproteinAI，apo A1)

4、和載脂蛋白B(apolipoprotein B，apo B)對apo M檢測結(jié)果干擾作用??；批內(nèi)、批間變異均<10％。
　　 2.apoM女性正常參考值為22.55±11.60μ g/mL，男性正常參考值為21.44±12.71μg/mL，健康人群的正常參考值范圍為22.06±12.10μ g/mL；健康人群血清apoM水平與甘油三酯(totaltriglycerides，TG)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.186，p<0.05)，但與總

5、膽固醇(totalcholesterol，TC)(r=0.106，p<0.05)和高密度脂蛋白膽固醇(high-densitylipoprotein cholesterol，HDL-C)(r=0.395，p<0.01)呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 3.2型糖尿病患者血清apoM水平(23.36±13.55μ g/mL)低于對照組(26.86±10.40μ g/mL)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)；糖尿病組血清apoM水

6、平與TC呈正相關(guān)(r=0.235，p<0.05)，與HDL-C呈正相關(guān)(r=0.183，p<0.05)，與hs-CRP呈負(fù)相關(guān)(r=-0.185，p<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.本研究建立了一種定量檢測人血清apoM濃度的雙抗體夾心ELISA法，該方法具有較好的敏感性和特異性；確定了該方法檢測人血清apoM濃度的正常參考值范圍。
　　 2.2型糖尿病患者血清apoM濃度降低；apoM水平與TC、HDL-