單核細胞趨化蛋白-1對大鼠試驗性視網膜脫離過程中光感受器細胞凋亡的影響.pdf

1、目的：1.探討MCP-1在Brown Norway大鼠試驗性視網膜脫離中的表達，及其與視網膜脫離過程中光感受器細胞凋亡的相關性。2.探討干預脫離的視網膜MCP-1的表達，光感受器細胞凋亡的變化。 方法： (1)取3 7只Brown Norway大鼠右眼建立視網膜脫離模型，左眼自身對照。排除因死亡，眼內炎和視網膜出血等不符合視網膜脫離模型標準的大鼠7只。剩余30只大鼠按預處理時間點(1小時，6小時，12小時，24小時和72

2、小時)隨機分為五組，每組6只。預定時間點處死大鼠，取出眼球。免疫組化技術檢測實驗眼與對照眼視網膜外核層MCP-1的表達；TUNEL原位末端標記法檢測實驗眼與對照眼外核層凋亡細胞陽性表達細胞數(shù)。統(tǒng)計軟件分析MCP-1與TUNEL表達的相關性。 (2)9只Brown Norway大鼠雙眼建立視網膜脫離模型后，沿原穿刺口右眼視網膜下注射抗大鼠MCP-11gG抗體，左眼注射等容積的PBS。排除因死亡，眼內炎和視網膜出血等不符合視網膜脫離

3、模型標準的大鼠3只。剩余6只大鼠模型建立后72小時處死，剜出眼球，制作石蠟切片，應用TUNEL原位末端標記法計數(shù)外核層陽性細胞。統(tǒng)計學方法比較72小時視網膜脫離組，MCP-1干預組和假干預組的外核層凋亡細胞的表達。 結果： (1)免疫組化：正常視網膜MCP-1很少表達，點狀分布于內核層，外核層和神經節(jié)細胞層，每個高倍鏡下外核層陽性表達細胞數(shù)平均為3.64±1.02。試驗性視網膜脫離模型建立1小時、6小時、12小時、24小

4、時和72小時后MCP-1表達主要分布于外核層，內核層與神經節(jié)細胞層較少表達，外核層高倍鏡下MCP-1陽性表達細胞數(shù)分別為10.5 0±2.82、11.13±3.31、25.23±5.56、3 7.23±7.1 5和205.83±1 5.23，與對照組均有統(tǒng)計學差異。視網膜脫離組之間相互比較，除視網膜脫離1小時和6小時無統(tǒng)計學差異外，其余各組均有顯著性差異(P<0.05)。 (2)TUNEL：正常視網膜外核層TUNEL陽性細胞數(shù)為

5、2.1 6±1.3 3/mm2，試驗性視網膜脫離模型建立1小時、6小時、12小時、24小時和72小時外核層TUNEL陽性表達細胞數(shù)分別為1 5.30±3.21/mm2、25.11±5.3 1/mm2、4 1.32±7.5 6/mm2、80.23±10.1 5/mm2和425.83±2 5.23/mm2。 (3)各組大鼠實驗眼視網膜ONL內MCP-1及TUNEL陽性細胞均于RD后1h開始升高，隨時間延長表達增加，72小時達到高峰，

6、二者的表達呈顯著正相關(r=0.905)。 (4)視網膜脫離后72小時MCP-1干預組和PBS假干預組外核層TUNEL陽性表達細胞數(shù)為1 60.24±10.5 6/mm2和430.15±30.42/mm2。MCP-1干預組與視網膜脫離組統(tǒng)計學上具有顯著性差異(p<0.05)，而PBS假干預組與視網膜脫離組統(tǒng)計學無顯著性差異(p>0.05)。 結論：(1)MCP-1在大鼠試驗性視網膜脫離模型建立后1小時即明顯表達，隨時間延