四種醫(yī)用金屬對(duì)L-929細(xì)胞毒性及MMP-1表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　 生物醫(yī)用金屬材料在口腔材料中是應(yīng)用最多最廣的一類材料。新型醫(yī)用無鎳高氮奧氏體不銹鋼(BIOSSN4)是由中科院金屬研究所研制的適合我國現(xiàn)有國情的一種高性價(jià)比的用于鑄造支架及弓絲的金屬材料,它良好的機(jī)械性能已經(jīng)通過實(shí)驗(yàn)得到驗(yàn)證,但生物相容性還需要進(jìn)一步的研究,為其廣泛應(yīng)用于臨床提供依據(jù)。本文利用熒光顯微鏡觀察四種醫(yī)用金屬(BIOSSN4、Aualloy、317L、Co-Cralloy)引起小鼠L-929成纖維細(xì)胞的形

2、態(tài)變化及MTr細(xì)胞毒性檢測和MMP-1ELISA檢測,從細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)兩個(gè)方面研究四種醫(yī)用金屬的生物相容性。
　　 材料和方法:
　　 細(xì)胞培養(yǎng):L-929細(xì)胞用含10%胎牛血清RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并傳代。
　　 細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測:設(shè)立實(shí)驗(yàn)組:①新型無鎳高氮奧氏體不銹鋼組(BIOSSN4)②金合金組③奧氏體不銹鋼組(317L不銹鋼組)④鈷鉻合金組(Co-Cr);陰性對(duì)照組:陽

3、性鉛Pb對(duì)照組。其中五種金屬浸提液和含10%胎牛血清RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液分別培養(yǎng)L-929細(xì)胞48小時(shí)后,采用Hoechst33342/PI染色法在熒光顯微鏡下對(duì)活細(xì)胞、凋亡細(xì)胞、壞死細(xì)胞進(jìn)行觀測。
　　 MTT細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)用四個(gè)實(shí)驗(yàn)組金屬材料的浸提液、陰性對(duì)照培養(yǎng)液、陽性對(duì)照金屬鉛浸提液培養(yǎng)L-929細(xì)胞,從而比較四個(gè)實(shí)驗(yàn)組金屬材料的細(xì)胞毒性。
　　 MMP-1ELISA檢測用四個(gè)實(shí)驗(yàn)組金屬材料的浸提液培養(yǎng)L-9

4、29細(xì)胞,比較各組分泌MMP-1的量,進(jìn)而說明各組金屬材料對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的影響。
　　 結(jié)果:
　　 1、各組細(xì)胞加樣培養(yǎng)48h后Hoechst33342/PI雙染,熒光顯微鏡觀察各實(shí)驗(yàn)組均有凋亡、壞死細(xì)胞。317L組凋亡細(xì)胞較多,陽性鉛Pb對(duì)照組壞死細(xì)胞很多。其它實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組相比無明顯改變。
　　 2、MTT結(jié)果:24h、48h、72hL-929細(xì)胞在各金屬浸提液中細(xì)胞相對(duì)增殖率都有所上升,毒性評(píng)級(jí)結(jié)果:各

5、實(shí)驗(yàn)組均有輕微細(xì)胞毒性。
　　 3、隨著時(shí)間的增加,各實(shí)驗(yàn)組分泌的MMP-1量有上升趨勢。說明隨時(shí)間延長,MMP-1分泌量增加,破壞膠原纖維,附著喪失,會(huì)進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)。各組分泌MMP-1量由小到大依次為:陰性對(duì)照組＜金合金組＜鈷鉻合金組＜BIOSSN4組＜317L組,且各實(shí)驗(yàn)組有顯著差異。
　　 結(jié)論:
　　 1、實(shí)驗(yàn)金屬生物相容性由好到差依次是:金合金＞新型醫(yī)用無鎳高氮奧氏體不銹鋼、鈷鉻合金＞奧氏體不銹鋼