寡核苷酸芯片分析人卵巢癌細胞系RMG-1轉(zhuǎn)染α1，2-FT基因后癌相關(guān)基因的表達差異.pdf

1、目的：利用基因芯片技術(shù)對α1，2-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶(α1，2-fucosyltransferase，α1，2-FT)基因轉(zhuǎn)染后人卵巢癌細胞RMG-1-H和空載體處理的相同細胞RMG-1-C的mRNA進行檢測，分析其基因表達的差異，探討轉(zhuǎn)染α1，2-FT對卵巢癌細胞系RMG-1癌相關(guān)基因的影響。 方法: 利用一步法提取卵巢癌細胞RMG-1-H及RMG-1-C總RNA并制備cDNA，合成生物素標(biāo)記的cRNA探針，對兩種樣品進行熒

2、光交換，分別與人腫瘤相關(guān)寡核苷酸基因芯片進行雜交，經(jīng)洗片后用LuxScan 10KA雙通道激光掃描儀掃描芯片熒光信號圖像，用GenePix Pro 4.0圖像分析軟件對掃描圖像進行數(shù)字化處理，在GoMiner在線數(shù)據(jù)庫進行信息查詢。 結(jié)果: 細胞系RMG-1-H有88種差異性表達基因，其中60種基因表達增強，28種基因表達降低。對其進行基因功能的檢索，發(fā)現(xiàn)在分子功能、生物學(xué)行為和細胞成分定位三個分支上，轉(zhuǎn)染α1，2-FT

3、基因后RMG-1-H在蛋白質(zhì)結(jié)合、核苷酸結(jié)合，細胞增值、DNA依賴性轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白氨基酸磷酸化、轉(zhuǎn)錄、細胞黏附等方面表現(xiàn)出了比較明顯的改變，并推測α1，2-FT基因轉(zhuǎn)染主要在細胞核水平影響著卵巢癌細胞的生物學(xué)行為。 結(jié)論: 轉(zhuǎn)染α1，2-FT基因使卵巢癌細胞系RMG-1-H蛋白質(zhì)結(jié)合、核苷酸結(jié)合，細胞增值、DNA依賴性轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白氨基酸磷酸化、轉(zhuǎn)錄、細胞黏附等方面在RNA水平上調(diào)，為進一步研究α