麻黃水提液體外抗RSV實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 探討麻黃水提液在體外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用及其作用機(jī)制，為治療呼吸道合胞病毒感染尋找新型藥物。 方法： 1、將中藥麻黃加水熬制，采用負(fù)壓抽濾后合并濾液，用減壓蒸發(fā)的方法濃縮制成水提液。 2、采用體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，通過目測(cè)法和MTT法檢測(cè)麻黃水提液對(duì)Hela細(xì)胞的毒性。 3、以利巴韋林為陽(yáng)性對(duì)照，對(duì)麻黃水提液進(jìn)行體外抗RSV的藥效學(xué)檢測(cè)。用空斑減數(shù)實(shí)驗(yàn)測(cè)得麻黃和利巴韋林抑制RSV的

2、半數(shù)有效劑量。用細(xì)胞病變抑制實(shí)驗(yàn)檢測(cè)麻黃水提液對(duì)RSV的吸附與穿入的抑制作用以及其對(duì)RSV的直接抑制作用。用空斑減數(shù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)麻黃水提液在不同濃度不同時(shí)間對(duì)RSV的抑制作用。 結(jié)果： 1、麻黃水提液對(duì)Hela細(xì)胞的半數(shù)中毒濃度(CC50)目測(cè)法為12.58mg/ml，MTT法結(jié)果為12.21 mg/ml，利巴韋林對(duì)Hela細(xì)胞的CC50目測(cè)法為0.42 mg/ml，MTT法為0.44 mg/ml。麻黃水提液對(duì)RSV的半數(shù)有

3、效劑量(EC50)為3.74mg/ml，選擇系數(shù)(SI)為3.26，利巴韋林EC50為35.66 μg/ml，SI為12.34。 2、麻黃水提液和利巴韋林對(duì)RSV吸附到Hela細(xì)胞上的過程和穿入細(xì)胞膜的過程均有明顯的抑制作用(P<0.01)；麻黃水提液對(duì)RSV還有直接抑制作用(P<0.05)；5.00mg/ml、4.00mg/ml、3.20 mg/ml、2.56 mg/ml麻黃水提液4個(gè)劑量組在RSV感染后8小時(shí)內(nèi)給藥均能抑制R

4、SV(P<0.05)；各濃度間，相同濃度不同時(shí)間給藥對(duì)病毒的抑制均有差異(P<0.05)，時(shí)間和濃度兩個(gè)因素之間存在交互作用。濃度越高，用藥時(shí)間越早，抑制RSV的作用越大；濃度越低，用藥時(shí)間越晚，對(duì)RSV的抑制作用越小。利巴韋林在8小時(shí)內(nèi)給藥也對(duì)RSV有抑制作用。 結(jié)論： 1、5.00mg/ml麻黃水提液能阻止RSV對(duì)細(xì)胞的吸附，也能抑制RSV對(duì)細(xì)胞膜的穿透。 2、麻黃水提液2.5mg/ml時(shí)就對(duì)RSV有直接抑制