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1、第一部分 先天性長QT綜合征KCNQ1基因L191P突變體原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其功能檢測(cè);目的:構(gòu)建先天性長QT綜合征KCNQ1基因L191P突變體的原核表達(dá)載體,利用非洲爪蟾卵母細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行電生理學(xué)研究,探討K001家系患者攜帶的L191PKCNQ1突變引起LQTS的機(jī)制.結(jié)論:K001家系中患者攜帶的KCNQ1 L191P基因突變通過降低電流幅度和減少通道開放,使Iks電流減弱,動(dòng)作電位時(shí)程延長,導(dǎo)致LQTS.第二部分 先天性長
2、QT綜合征KCNQ1基因F275S突變體原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其功能檢測(cè);目的:構(gòu)建先天性長QT綜合征KCNQ1基因F275S突變體的原核表達(dá)載體,利用非洲爪蟾卵母細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行電生理學(xué)研究,探討K002家系患者攜帶的F275SKCNQ1突變引起LQTS的機(jī)制.結(jié)論:K002家系中患者攜帶的L191P KCNQ1基因突變通過通過"負(fù)顯性"作用干擾了野生型KCNQ1的功能,使Iks電流減弱,引起動(dòng)作電位時(shí)程延長,導(dǎo)致LQTS.第三部分先天
3、性長QT綜合征KCNQ1基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在HEK293細(xì)胞中的表達(dá);目的:構(gòu)建KCNQ1基因的真核表達(dá)載體,并在人胚胎腎細(xì)胞(HEK293)中進(jìn)行表達(dá).結(jié)論我們?cè)贙CNQ1基因原核表達(dá)載體的基礎(chǔ)上,首先構(gòu)建了KCNQ1基因的真核表達(dá)載體pIRES<,2>-EGFP-KCNQ1,利用脂質(zhì)體將其轉(zhuǎn)染至HEK293細(xì)胞中并成功地進(jìn)行了表達(dá),為下一步進(jìn)行膜片鉗的研究奠定基礎(chǔ).第四部分先天性長QT綜合征KCNQ1基因L191P和F275
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