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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子叉頭框M1(Forkhead box M1,FoxM1)在慢性鼻-鼻竇炎(Chronic rhinosinusitis,CRS)患者鼻黏膜組織表達(dá)情況及炎性細(xì)胞因子或細(xì)菌毒素對(duì)鼻黏膜細(xì)胞FoxM1表達(dá)的影響,以便了解FoxM1在CRS發(fā)病中的作用。
方法:取20例不伴息肉CRS患者、20例伴息肉CRS患者和10例單純鼻中隔偏曲患者的鼻黏膜組織行蘇木精-伊紅染色(HE染色),查看各組織病理特點(diǎn),并行免疫組化、實(shí)
2、時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)組織中FoxM1的水平,對(duì)所得數(shù)據(jù)之間關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。體外培養(yǎng)人鼻黏膜上皮細(xì)胞,對(duì)所培養(yǎng)細(xì)胞運(yùn)用免疫熒光染色法進(jìn)行鑒定,穩(wěn)定傳代后設(shè)立實(shí)驗(yàn)組及空白對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組分別給予活化因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)、白介素-17(IL-17)、干擾素-γ(IFN-γ)、葡萄球菌腸毒素B(SEB)后,應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法、Western Blot法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組及空白對(duì)照組FoxM1的
3、表達(dá)情況。
結(jié)果:HE染色示CRS患者鼻黏膜上皮細(xì)胞及黏膜下腺體增生,黏膜下組織內(nèi)可見(jiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。免疫組化結(jié)果示兩組CRS患者的鼻黏膜組織中FoxM1的表達(dá)均較對(duì)照組升高(P<0.05)。兩組CRS患者之間FoxM1的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。熒光定量PCR結(jié)果顯示兩組CRS患者的鼻黏膜組織中FoxM1 mRNA的表達(dá)均較對(duì)照組上調(diào)(P<0.05),而兩組CRS之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
4、 建立原代鼻黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)模型,經(jīng)細(xì)胞角蛋白AE1抗體免疫熒光染色證實(shí)為上皮源性后進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。對(duì)穩(wěn)定傳代的細(xì)胞給予IL-1β、IL-4、IL-5、IL-17、IFN-γ、SEB刺激后,熒光定量PCR及蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)示FoxM1的基因及蛋白表達(dá)水平均較空白對(duì)照組上調(diào),且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:在CRS中FoxM1的表達(dá)上調(diào),且多種細(xì)胞因子及細(xì)菌毒素可誘導(dǎo)鼻黏膜上皮細(xì)胞FoxM1表達(dá)的增多,F(xiàn)oxM1可能
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