系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者Ets-1表達(dá)及其調(diào)控微小RNAs的研究.pdf

1、目的：
　　檢測系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者外周血單個核細(xì)胞(PBMCs)中 Ets-1及其相關(guān)微小RNAs(miR-326、miR-155、miR-221、miR-222)的表達(dá)水平,分析其與狼瘡活動指標(biāo)和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)(抗核抗體、血沉、C-反應(yīng)蛋白、免疫球蛋白等)的相關(guān)性,探討其在SLE發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　方法：
　　收集安徽省立醫(yī)院風(fēng)濕免疫科門診及住院部SLE患者50例,均符合1997年美國風(fēng)濕病學(xué)會分類診斷標(biāo)準(zhǔn)

2、,采用SLEDAI判斷疾病活動度(≥5分為活動組,<5分為穩(wěn)定組),其中SLE活動組30例(男性3例,女性27例),SLE穩(wěn)定組20例(男性3例,女性17例)。健康對照組為20名健康志愿者,均無自身免疫病史。SLE患者和健康志愿者之間性別、年齡差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。采集清晨空腹肘靜脈EDTA抗凝血10ml。
　　以Ets-1為靶基因,利用生物信息學(xué)方法(miRanda、TargetScan和PicTar軟件)篩選出相關(guān)miRNAs(

3、miR-326、miR-155、miR-221、miR-222)。將EDTA抗凝血采用密度梯度離心法提取 PBMCs,應(yīng)用 Trizol提取 RNA,利用 PrimeScript和All-in-One miRNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒分別得到相應(yīng)的cDNA;應(yīng)用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù),根據(jù) SYBR Green PCR和All-in-One miRNA qPCR試劑盒檢測 Ets-1及miRNAs表達(dá)水平,并與患者血白細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞百分比、血小

4、板數(shù)、補(bǔ)體(C3和C4)、免疫球蛋白、ANA、ENA等資料進(jìn)行相關(guān)分析。
　　結(jié)果：
　?、?SLE活動組和穩(wěn)定組Ets-1表達(dá)水平[0.54(0.37～0.66)和0.50(0.35~0.71)]與健康對照組[0.74(0.64～1.14)]相比均顯著減低(Z=-3.525,P<0.01;Z=-3.273,P<0.01);
　?、?SLE活動組miR-326、miR-155、miR-221、miR-222表達(dá)水平比S

5、LE穩(wěn)定組、健康對照組顯著增高(P<0.05);
　?、?SLE組miRNAs與Ets-1之間無相關(guān)性(P>0.05);
　　④ SLE組Ets-1與SLEDAI之間無相關(guān)性(P>0.05);4種miRNAs與SLEDAI呈正相關(guān)(r=0.475,0.542,0.397,0.057;P<0.05);
　?、?SLE組Ets-1與抗核抗體呈負(fù)相關(guān)(r=-0.366,P<0.05);miR-155、miR-221、miR-