大鼠冠狀動脈微栓塞后心肌重塑及心功能損害與培多普利干預(yù)的實驗研究.pdf

1、背景 冠脈微栓塞(CME)是冠心病尤其是急性冠脈綜合征(ACS)患者常見的并發(fā)癥。斑塊自發(fā)破裂、冠脈介入治療中擠壓碎裂及溶栓術(shù)中血栓溶解不全產(chǎn)生的微栓子及此過程中多種血管活性物質(zhì)釋放是CME發(fā)生及冠脈微循環(huán)障礙的主要機(jī)制。與ACS中導(dǎo)血冠脈閉塞比較，CME對患者同樣有嚴(yán)重不良影響，而且其有效防治措施有限。目前此方面的研究更多的是關(guān)注CME的檢測及急性期治療，而對其發(fā)生后慢性過程中心臟重塑及心功能損害的有效干預(yù)措施則缺少深入研究。

2、因此，探討CME后慢性過程中心肌重塑及心功能損害的證據(jù)、機(jī)制及有效干預(yù)措施具有重要的理論及臨床意義。 目的 利用大鼠自體的血栓微粒造成心肌內(nèi)小冠脈栓塞，建立冠脈微栓塞模型，主要目的為：1.探討心肌重塑包括心肌慢性丟失、心肌微血管重塑和心肌間質(zhì)重塑，心室(臟)重塑，以及心功能動態(tài)變化；2．探索參與心肌和心室重塑可能的分子生物學(xué)機(jī)制；3．觀察血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑一培多普利(Perindopril)干預(yù)對CME后心肌及心室重

3、塑及心功能的影響。 方法 以清潔級SD大鼠為研究對象，自心尖部注入大鼠自體血栓微粒造成心肌內(nèi)微小血管栓塞，建立冠脈微栓塞模型。64只大鼠隨機(jī)分成4組，即對照組(CL組)、假手術(shù)組(SO組)、冠脈微栓塞組(ME組)和培多普利干預(yù)組(AI組)，每組16只。HE染色觀察心肌內(nèi)微小梗死灶數(shù)量(Nmmi)及梗死灶所占百分比(Ammi)，Picrosirius-Red染色檢測心肌細(xì)胞間質(zhì)膠原纖維面積百分比(Fcf)，Ⅷ因子染色檢測單

4、位面積心肌內(nèi)微小冠狀血管的數(shù)量(Nmv)，超聲心動圖觀察左室收縮末期內(nèi)徑(LVESD)及舒張末期內(nèi)徑(LVEED)，左室短軸縮短率(LVFS)及左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)，活化型caspase-3免疫組化法及Tunel法檢測心肌細(xì)胞凋亡率(Rapol、Rap02)、Westemblot檢測caspase-3蛋白及TNF-a蛋白的表達(dá)量(IOD)。 結(jié)果LCME后28天各組及培多普利干預(yù)后大鼠微小心肌梗死灶數(shù)量及面積比測量CL組、S

5、O組、ME組和AI組Nmmi分別是0．02個、0．02個、5．17個和3．00個；Ammi分別是(L60±0．07)％、(L60±O．07)％、(38．43±8．94)％和(8．30±3．08)％。與CL組比，ME組Nmmi和Ammi明顯增多(P<0．01)；與ME組比，AI組Nmmi和Ammi顯著減少(P＜0．01)。 2．CME后28天各組及培多普利干預(yù)后心肌間質(zhì)膠原纖維所占面積百分比測量CL組、S0組、ME組和AI組Fcf

6、分別是(O．47±0．24)％、(O．47±O．31)％、(28．68±7．43)％和(2．50±0．98)％。與CL組比，ME組Fcf明顯增多(P<0．0D；與艇組相比，AI組Fcf顯著減少(P

7、0．05)。 3．CME后7-28天各組及培多普利干預(yù)后左室功能指標(biāo)超聲測量術(shù)后7d、14d和28d，與CL組比，ME組LVEDD及LVESD顯著增加(P<0．01)，LVFS及LVEF顯著降低(P<0．01)；與ME組比，AI組LVEDD及LVESD顯著降低(P<0．01)，LVFS及LVEF顯著增高(P<0．0D；她組內(nèi)術(shù)后1d、1周、2周、4周LVEDD、LVESD、LVFS

8、及LVEF進(jìn)行性的降低(P<0．01)。 4．CME后28天各組及培多普利干預(yù)后心肌微小冠脈密度測定術(shù)后28d，CL組、S0組、肛組和AI組Nmv分別是4．34±L21根／mm2、4．34±1．50根／mm2、L16±0．40根／mm2、3．20±L64根／mm2。與CL組比，ME組心肌Nmv顯著減少(P<0．0D；與ME組比，AI組心肌Nmv顯著增高(P<0．01)。 5．CME后28天各組及培多普利干預(yù)后心肌細(xì)胞凋亡

9、率測定 各組心肌細(xì)胞Rap01分別是(1．58~1．08)％、(L61~1．02)％、(5．03~1．21)％和(3．38~1．35)％：與CL組比，ME組Rapol顯著增高(P<0．0D：AI組與ME組比，AI組Rapol顯著降低(P<0．01)。 各組心內(nèi)膜區(qū)Rap01分別是(L22~0．67)％、(1．02~0．61)％、(6．15~1．60)％和(3．72~1．0D％；與CL組比，ME組心內(nèi)膜區(qū)心肌細(xì)胞Rapol

10、顯著升高(P<0．01)；與ME組比，A工組心內(nèi)膜區(qū)心肌細(xì)胞Rapol顯著低于ME組(P

11、2)％和(3．34±L64)％；與CL組比，ME組心內(nèi)膜區(qū)Rap02明顯升高(P<0．0D；與ME組比，AI組心內(nèi)膜區(qū)Rap02顯著降低(P<0．01)。 6．CME后28天各組及培多普利干預(yù)后caspase-3及TNF-Q蛋白表達(dá)變化CME后28d，與CL組比，ME組caspase-3及TNF-αQ的IOD顯著增加(P<0．01)；與ME組比，AI組caspase-3及TNF-α的IOD顯著減少(P<0．01)。 結(jié)論

12、1．冠脈微栓塞后慢性過程中，因心肌細(xì)胞凋亡、間質(zhì)微血管丟失及膠原纖維增殖使心肌、心室和心臟發(fā)生了慢性進(jìn)行性重塑。 2．冠脈微栓塞后慢性過程中，心肌重塑、心室重塑和心臟重塑是導(dǎo)致慢性進(jìn)行性心功能損害的基本機(jī)制。 3．冠脈微栓塞后慢性過程中，持續(xù)性Caspase-3的激活及TNF=a的表達(dá)可能是CME后心肌細(xì)胞凋亡的主要原因之一，TNF-a還可能參與心肌間質(zhì)重塑。 4．冠脈微栓塞后慢性過程中，培多普利干預(yù)可降低心肌細(xì)