早老病與擴心病的LMNA基因的突變研究.pdf

1、一、早老病患者的LMNA基因突變篩查
　　 早老綜合癥(Hutchinson-Gilford progeria syndrome，HGPS，OMIM176670)，又簡稱早老病，是一種極為罕見的、早發(fā)并且嚴重的過早老化性疾病，其主要的臨床特征表現(xiàn)為身材矮小、體重低、早期脫發(fā)、脂肪營養(yǎng)障礙、硬皮病、關節(jié)可動性降低、家族性肢端骨質溶解和老年人面容。早老病多始發(fā)于一歲之內，兩歲之后才能做出診斷，平均存活年齡為13.4歲，一般存活年齡在

2、7歲到27歲之間，極少數(shù)能活到45歲，心腦血管疾病是早老病主要的死因。早老病患者多為兒童，研究報道在全世界范圍內發(fā)病率為1/4000000～1/8000000。男性多發(fā)于女性，比例大約為1.5∶1。目前，國內尚無早老病發(fā)病率的相關報道。
　　 研究結果表明，早老病的發(fā)生與LMNA基因的突變有關。LMNA基因突變可以引起一系列核纖層蛋白異常變化，從而引發(fā)相關的核纖層蛋白疾病，比如早老病、擴心病等。LMNA基因不同的突變會引起不同患

3、者表現(xiàn)出相似的疾病表型。此外，同一個基因突變又可引起不同患者表現(xiàn)出不同的疾病表型。中國人群早老病患者與LMNA基因的突變篩查研究極少，而不同種族的遺傳易感因素存在著很大的差別，因此，對中國漢族早老病患者及其家系進行LMNA基因的突變篩查，有助于了解在中國漢族人群中LMNA基因的變異與早老病的關系。
　　 為了闡明中國漢族人群早老病的遺傳基礎，本研究收集了1個中國漢族早老病家系和100個正常對照，采用PCR擴增和直接測序的方法分析

4、該早老病家系所有成員與正常對照的LMNA基因序列，尋找與該早老病家系相關的LMNA基因突變。
　　 本研究在1個早老病家系的所有成員中檢測到位于LMNA基因的變異c.1579C＞T，該變異引起的第527位的精氨酸改變?yōu)榘腚装彼?p.R527C)，其中先證者及其弟弟為LMNA c.1579C＞T的純合改變，父母親均為LMNA c.1579C＞T的雜合改變;在100例正常對照中未檢測到LMNA基因的突變。
　　 本研究表明該

5、早老病家系患者系LMNA基因的純合突變p.R527C所致。
　　 二、擴張性心肌病患者的LMNA基因突變篩查
　　 擴張型心肌病(Dilated cardiomyopathy，DCM，OMM115200)是以心臟擴張和收縮功能障礙為典型特征的一類遺傳高度異質性、臨床多樣性的疾病，是心肌疾病中最常見的一種類型。其臨床特征主要表現(xiàn)為心力衰竭、猝死、心律紊亂和血栓栓塞。擴張型心肌病起病相對緩慢，男性多發(fā)于女性（男∶女=2.5∶

6、1），群體的發(fā)病年齡在20～50歲之間，而個體發(fā)病年齡日益趨于年輕化，5年病死率為15％～50％，生存率不到50％。DCM主要呈散發(fā)性，歐美地區(qū)相關資料統(tǒng)計DCM每年的發(fā)病率大約為7/100000。在日本，特發(fā)性擴張型心肌病(Idiopathic dilated cardiomyopathy，iDCM)的發(fā)病率相對較低，約為1.2/100000。在中國，1992年南京市的一項調查研究發(fā)現(xiàn)DCM的發(fā)病率約為1.3/10000。據(jù)文獻報道，

7、近年來DCM的發(fā)病率在國內外均有上升趨勢，該病仍然是世界上心血管疾病的一大難題。目前，DCM的病因及確切的發(fā)病機制尚未闡明，但是，分子遺傳學研究表明DCM的發(fā)生與遺傳因素明顯相關，約35％的DCM患者呈家族性遺傳，現(xiàn)研究已發(fā)現(xiàn)27個染色體位點上的43個突變基因與DCM有關，其中32個基因與常染色體顯性遺傳的家族性擴張型心肌病(Familial dilated cardiomyopathy，F(xiàn)DCM)的發(fā)生有關，LMNA基因是FDCM伴傳

8、導阻滯的致病基因。目前文獻報道的能引起DCM發(fā)生的LMNA基因突變包括R60G, L85R，K97E，ElllX，E161K，Argl90Trp, N195K, E203G, E317K, R377H, L59R, S573L, Glu53Val,Glu186Lys等，這些突變分布在所有12個外顯子上。
　　 本課題組前期初步完成了一個擴心病家系的候選基因定位與克隆研究，為了進一步探討中國漢族人群DCM發(fā)生的遺傳基礎，2009年

9、-2011年，我室與中南大學湘雅醫(yī)院合作收集了1個擴張型心肌病家系和31個散發(fā)的擴心病患者，利用PCR擴增和sanger直接測序的方法對LMNA基因進行突變檢測分析，尋找與DCM相關的新發(fā)突變，為更好地預防、診斷和治療DCM奠定良好的研究基礎。
　　 本研究通過對1個DCM家系內的所有患者和31個散發(fā)的DCM患者進行了LMNA基因突變篩查，發(fā)現(xiàn)了8個變異，與dbSNP數(shù)據(jù)庫相比對，其中c.(-)212 t＞c、 c.*319 a