精氨酸對熱應激損傷大鼠胸腺和巨噬細胞保護作用機制探討.pdf

1、應激是指各種有害或過強刺激引起的機體非特異性全身反應，高溫作為一種環(huán)境熱應激可導致機體多種生理、生化和組織學的改變，脂質(zhì)過氧化增強，并引起胸腺和淋巴組織萎縮，甚至造成機體代謝紊亂，組織器官功能衰竭。 胸腺是機體重要的免疫器官，是T細胞發(fā)育和成熟的場所，在整個免疫系統(tǒng)中起著中樞作用。而各種應激如嚴重感染、創(chuàng)傷、高溫、高滲、缺氧、輻射和氧化應激等，都能導致胸腺損傷，造成胸腺萎縮，影響胸腺細胞分化、發(fā)育，誘導胸腺細胞凋亡。 在

2、免疫營養(yǎng)的發(fā)展中，精氨酸(L-Arg)以其獨特的生理與藥理作用而引人注意。具有兩個堿基的L-Arg是堿性最強的半必需氨基酸，僅在未成熟狀態(tài)或嚴重應激時，對于機體才是必不可少的，有利于機體蛋白質(zhì)的合成，調(diào)節(jié)機體免疫功能。關(guān)于L-Arg對熱應激損傷機體免疫器官的保護作用國內(nèi)外有不少報道，但其確切機制仍有待于進一步研究和探討。 目的：通過觀察熱應激后大鼠生理反應、胸腺和脾臟指數(shù)、下丘腦-垂體-腎上腺軸皮質(zhì)醇的釋放、細胞膜脂流動性以及脂

3、質(zhì)過氧化的變化情況，探討補充L-Arg對熱應激損傷大鼠免疫器官保護作用的可能機制。 方法：將SD青春期雄性大鼠144只，采用三因素析因設計模型進行分組。首先，隨機分為三組，A組：灌水組；B組：補充L-Arg(1.5g/kg.bw)組；C組：飼以VE飼料(300mg/kg)組。然后于灌胃第13天早上將三組大鼠置于41℃(干球41℃、濕球33.5℃、相對濕度60％)的動物高溫實驗倉，按時間分為1h和2h組進行熱應激處理。最后各組又分

4、為常溫對照組和熱應激后0h、4h、8h組，每組大鼠樣本數(shù)均為6只。分別測量并比較各組大鼠在不同情況下的體重、肛溫、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)等生理指標；麻醉大鼠后，腹主動脈取血，用黃嘌呤氧化酶法測定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥酸法測定血清丙二醛(MDA)含量、用放射免疫法測定血清皮質(zhì)醇的濃度；分離腹腔巨噬細胞，利用激光掃描共聚焦顯微鏡(熒光漂白恢復術(shù)，F(xiàn)RAP)測定巨噬細胞膜脂流動性。 結(jié)果：一.生理指標的變化：常溫下，

5、各組大鼠肛溫的變化無顯著性差異(P＞0.05)，補充L-Arg組大鼠體重增加高于灌水組(P＜0.05)，各組大鼠胸腺和脾臟指數(shù)均無顯著性差異(P＞0.05)；熱應激后，各組大鼠肛溫均升高(P＜0.05)，體重下降同熱應激時間有關(guān)(P＜0.05)，胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均明顯低于常溫組(P＜0.05)；相同時間熱應激下，各組間大鼠體重下降無顯著性差異(P＞0.05)，補充L-Arg組大鼠胸腺和脾臟指數(shù)高于灌水組(P＜0.05)，而補充L-Ar

6、g組和飼以VE飼料組大鼠之間無顯著性差異(P＞0.05)；熱應激2h后灌水組大鼠胸腺和脾臟指數(shù)明顯低于熱應激1h后(P＜0.05)，補充L-Arg組和飼以VE飼料組大鼠則下降不明顯(P＞0.05)。各組大鼠的胸腺和脾臟指數(shù)熱應激后3個時間點均低于常溫組(P＜0.05)，并且兩指數(shù)在4h達到最低點，8h后逐漸回升，但仍低于常溫對照組(P＜0.05)。 二.血清皮質(zhì)醇含量的變化：常溫下各組大鼠血清皮質(zhì)醇含量無顯著性差異(P＞0.05

7、)；熱應激后各組大鼠的血清皮質(zhì)醇含量明顯高于常溫組(P＜0.05)，并且在4h達到最高，8h后逐漸回復，但仍高于常溫對照組(P＜0.05)；補充L-Arg組大鼠的血清皮質(zhì)醇含量明顯低于飼以VE飼料組和灌水組(P＜0.05)；飼以VE飼料組和灌水組大鼠熱應激2h后血清皮質(zhì)醇含量較熱應激1h后明顯升高(P＜0.05)，而補充L-Arg組則升高不明顯(P＞0.05)。 三.巨噬細胞膜脂流動性的變化：常溫下各組巨噬細胞膜脂流動性變化無顯

8、著性差異(P＞0.05)；熱應激后灌水組大鼠的巨噬細胞膜脂流動性升高不明顯(P＞0.05)，補充L-Arg組和飼以VE飼料組大鼠的巨噬細胞膜脂流動性明顯高于灌水組(P＜0.05)，但補充L-Arg組和飼以VE飼料組大鼠之間的巨噬細胞膜脂流動性變化沒有顯著性差異(P＞0.05)。 四.SOD、MDA的變化：常溫下各組大鼠的血清SOD活性、MDA含量沒有明顯的變化(P＞0.05)；熱應激后各組大鼠的血清SOD活性、MDA含量均明顯升

9、高(P＜0.05)，補充L-Arg組和飼以VE飼料組大鼠的血清SOD活性明顯高于灌水組(P＜0.05)，而MDA的含量則明顯低于灌水組(P＜0.05)，但是補充L-Arg組和飼以VE飼料組大鼠之間的血清SOD活性與MDA含量變化沒有顯著性差異(P＞0.05)。 結(jié)論：一.常溫下，各組大鼠的體重、肛溫、胸腺和脾臟指數(shù)的變化不明顯。 二.高溫應激可使大鼠的胸腺和脾臟急性萎縮，補充適量的L-Arg對熱應激大鼠胸腺具有較好的預防