豬組織工程皮膚構(gòu)建及移植的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:該實(shí)驗(yàn)旨在研究貴州小型香豬來源的組織工程皮膚自體及同種異體移植后種子細(xì)胞存活情況、表皮層角蛋白分化標(biāo)志的變化及血管和基底膜的形成情況,為復(fù)方殼多糖組織工程皮膚臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).方法:利用細(xì)胞培養(yǎng)方法分別構(gòu)建貴州小型香豬成纖維細(xì)胞(FB)庫和角質(zhì)形成細(xì)胞(KC)庫, BrdU標(biāo)記后按我科已建立的方法構(gòu)建貴州小型香豬復(fù)方殼多糖組織工程皮膚,經(jīng)體外皮膚器官型培養(yǎng)后分別行自體及同種異體移植實(shí)驗(yàn),觀察移植后豬組織工程皮膚的存活及創(chuàng)面愈合

2、情況.并于移植后1周、4周、8周取標(biāo)本,行組織學(xué)檢查和免疫組化染色,觀察自體及同種異體移植后豬組織工程皮膚再構(gòu)建、種子細(xì)胞存活、表皮層角蛋白的表達(dá)、表皮細(xì)胞分化、血管和基底膜的形成情況.結(jié)果:1.體外培養(yǎng)的貴州小型香豬角質(zhì)形成細(xì)胞呈多角形成或不規(guī)則形、"鋪路石"樣生長;成纖維細(xì)胞呈梭形,旋渦狀生長.2.體外構(gòu)建的豬復(fù)方殼多糖組織工程皮膚呈乳白色,具有良好的彈性和韌性.組織學(xué)顯示:表、真皮分界明顯,真皮膠原纖維束細(xì)而疏.3.豬組織工程皮膚

3、自體及同種異體移植后均存活,創(chuàng)面達(dá)到理想的愈合效果.4.豬組織工程皮膚自體及同種異體移植后BrdU標(biāo)記的種子細(xì)胞在8周內(nèi)免疫組化染色陽性,觀察到存活的種子細(xì)胞.5.豬組織工程皮膚自體及同種異體移植后組織學(xué)檢查顯示表皮明顯增厚,表皮突明顯,真皮膠原束顯著增粗變密,新生血管網(wǎng)豐富.6.豬組織工程皮膚自體及同種異體移植后免疫組化染色顯示:表皮層廣譜角蛋白抗體免疫組化染色陽性;基底層以上細(xì)胞角蛋白K10抗體免疫組化染色陽性;基底層細(xì)胞角蛋白K5