2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:應(yīng)用刀片刮取法及酶消化法獲取胎鼠和小鼠表皮細胞和成纖維細胞,對獲得的表皮細胞和成纖維細胞進行培養(yǎng)、鑒定,并應(yīng)用獲得的表皮細胞作為種子細胞,PGA作為支架,初步構(gòu)建含附件組織工程皮膚,為胎鼠表皮細胞的多向分化潛能提供良好的實驗?zāi)P?,并力求獲得生物學(xué)性能更完整的組織工程皮膚,為臨床應(yīng)用提供更理想的生物修復(fù)材料。
  方法:對刀片刮取法及酶消化法獲取的胎鼠和小鼠表皮細胞,以角質(zhì)細胞無血清培養(yǎng)基(K-SFM)進行培養(yǎng),觀察細胞生長狀

2、況及克隆形成情況,選擇Pan-CK多克隆抗體對細胞進行鑒定;對酶消化法獲取的胎鼠和小鼠成纖維細胞,以DMEM進行培養(yǎng),觀察細胞生長狀況及克隆形成情況,選擇vimentin單克隆抗體對細胞進行鑒定;應(yīng)用培養(yǎng)的表皮細胞、成纖維細胞及PGA支架初步構(gòu)建組織工程皮膚,觀察形成皮膚及附件的情況。
  結(jié)果:1.不同發(fā)育階段胎鼠和小鼠皮膚組織結(jié)構(gòu)觀察揭示了皮膚附件的生長發(fā)育規(guī)律,即在胚胎14.5天(embryo14.5天,E14.5天)時,雖

3、然表皮細胞僅為1-2層,但皮膚附件發(fā)育已經(jīng)開始,E16.5天時是皮膚附件發(fā)育最為旺盛的時期,E18.5天皮膚附件發(fā)育基本完成,生后7天(postnatal7,P7)時皮膚附件發(fā)育成熟。
  2.應(yīng)用刀片刮取法能成功獲取E14.5天的胎鼠表皮細胞,并能建立穩(wěn)定的表皮細胞系。
  3應(yīng)用酶消化法能分別獲取E16.5天,E18.5天,生后7天的胎鼠和小鼠表皮細胞及成纖維細胞,并能建立穩(wěn)定的細胞系。
  4.經(jīng)培養(yǎng)出的E14.

4、5天胎鼠表皮細胞、成纖維細胞和PGA支架構(gòu)建的組織工程皮膚,組織切片可見人造皮膚大體形態(tài)比較接近正常皮膚,表皮分層分化較完善,可見基底層、棘細胞層及角化層。
  結(jié)論:1.通過對不同發(fā)育階段胎鼠和小鼠皮膚組織結(jié)構(gòu)的觀察,我們初步掌握了皮膚附件的生長發(fā)育規(guī)律。
  2.刀片刮取法是一種獲取E14.5天的胎鼠表皮細胞較好的方法,可以得到數(shù)量較多,細胞活力較好的E14.5天的胎鼠表皮干細胞。
  3.消化法是一種獲得E16.

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