毛囊細(xì)胞與組織工程皮膚的構(gòu)建.pdf

1、近年來，隨著組織工程技術(shù)的迅速發(fā)展，組織工程皮膚已開始在臨床上廣泛使用。然而目前的組織工程皮膚的種子細(xì)胞來源主要是皮膚真皮成纖維細(xì)胞和表皮細(xì)胞，由此構(gòu)建的組織工程皮膚具有和正常皮膚相似的真皮和表皮雙層結(jié)構(gòu)但沒有毛囊、皮脂腺等皮膚附屬器官，在組織結(jié)構(gòu)上與正常皮膚組織仍有較大差異。 毛囊細(xì)胞在皮膚創(chuàng)傷修復(fù)中具有重要作用，可以作為種子細(xì)胞來源參與皮膚創(chuàng)傷后修復(fù)，而目前國內(nèi)外利用毛囊細(xì)胞構(gòu)建組織工程皮膚的文獻(xiàn)報道較少。本研究在分離培養(yǎng)毛

2、囊外根鞘細(xì)胞、毛乳頭細(xì)胞、真皮成纖維細(xì)胞以及表皮細(xì)胞的基礎(chǔ)上，對毛乳頭細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)，以證明其干細(xì)胞特性，為其作為毛囊化組織工程皮膚種子細(xì)胞提供依據(jù)；利用組織工程技術(shù)，以毛乳頭細(xì)胞作為真皮細(xì)胞，以外根鞘細(xì)胞和表皮細(xì)胞成功制備組織工程皮膚；同時，將毛乳頭細(xì)胞和外根鞘細(xì)胞重組并在腎被膜下培養(yǎng)，試圖尋找新的制備含毛囊結(jié)構(gòu)組織工程皮膚的方法。具體實驗如下： 1、以簡便快捷的培養(yǎng)方法獲得大量生長狀態(tài)良好的毛囊外根鞘細(xì)胞和毛乳頭細(xì)胞：以新

3、生SD大鼠為細(xì)胞來源，應(yīng)用機(jī)械法拔取完整生長初期毛囊，組織塊法培養(yǎng)毛乳頭細(xì)胞和外根鞘細(xì)胞。 2、利用常規(guī)的體外誘導(dǎo)方法對毛乳頭細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)，分別得到類成骨細(xì)胞和類脂質(zhì)細(xì)胞。 3、用實驗室設(shè)計的組織工程皮膚培養(yǎng)系統(tǒng)，分別用毛乳頭細(xì)胞和外根鞘細(xì)胞，毛乳頭細(xì)胞和表皮細(xì)胞構(gòu)建組織工程皮膚，結(jié)果均構(gòu)建出含真皮和表皮的組織工程皮膚，表明毛乳頭細(xì)胞可作為組織工程皮膚的種子細(xì)胞。 4、將毛乳頭細(xì)胞與外根鞘細(xì)胞重組離心，并將離

4、心所得細(xì)胞團(tuán)放入SD大鼠的腎被膜下培養(yǎng)。兩周后取出，經(jīng)髓染色觀察毛囊形成情況。結(jié)果移植物中有多個毛囊樣結(jié)構(gòu)出現(xiàn)。 本實驗成功構(gòu)建了以毛乳頭細(xì)胞為真皮細(xì)胞、以表皮細(xì)胞和外根鞘細(xì)胞為表皮細(xì)胞的組織工程雙層皮膚，并證明了毛乳頭細(xì)胞的干細(xì)胞特性。結(jié)果表明毛囊細(xì)胞作為種子細(xì)胞，不但增加了組織工程皮膚種子細(xì)胞的來源范圍，也為構(gòu)建含毛囊結(jié)構(gòu)的組織工程皮膚提供新的思路與方法，為組織工程皮膚的進(jìn)一步完善奠定了新的理論基礎(chǔ)，也為皮膚缺損的修復(fù)提供了