頭皮復(fù)合細(xì)胞結(jié)合人工真皮構(gòu)建組織工程皮膚的初步研究.pdf

1、第一部分頭皮復(fù)合細(xì)胞懸液制備方法的研究
　　研究目的：
　　研究應(yīng)用成人頭皮快速制備復(fù)合細(xì)胞懸液，包括表皮細(xì)胞(EC)和成纖維細(xì)胞(FB)，以及復(fù)合細(xì)胞合適混合比例。
　　實(shí)驗(yàn)方法：
　　1.以酶解法消化成人頭皮，獲得復(fù)合細(xì)胞。
　　2.分四組培養(yǎng)細(xì)胞，A組：EC/FB(I/O)；B組：EC/FB(0/1)；C組：EC/FB(2/1)；D組：EC/FB(6/1)。
　　3.以復(fù)合法快速消化成人頭皮，獲

2、得復(fù)合細(xì)胞。
　　研究結(jié)果：
　　1.酶解法消化成人頭皮，可以獲得復(fù)合細(xì)胞(包括表皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞)。
　　2.C組細(xì)胞增殖最快，但成纖維細(xì)胞過(guò)度增殖；D組細(xì)胞增殖速度比B組慢，比A組快，表皮細(xì)胞適度增殖。
　　3.復(fù)合法消化成人頭皮，與酶解法相比，所得細(xì)胞總數(shù)、存活率以及CD29、K19陽(yáng)性細(xì)胞比例無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；復(fù)合細(xì)胞比例接近D組EC/FB(6/1)比例，細(xì)胞增殖速度明顯增快。
　　結(jié)論：
　　

3、復(fù)合法消化成人頭皮，與酶解法相比，耗時(shí)更少，所得復(fù)合細(xì)胞比例更合適，增殖速度更快。
　　第二部分復(fù)合細(xì)胞結(jié)合人工真皮快速構(gòu)建組織工程皮膚的初步研究
　　研究目的：
　　研究復(fù)合細(xì)胞接種于人工真皮的效果，多方面檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
　　實(shí)驗(yàn)方法：
　　將復(fù)合法所得原代復(fù)合細(xì)胞接種于人工真皮表面構(gòu)建組織工程皮膚，進(jìn)行HE染色、掃描電鏡檢測(cè)、免疫組化(PAN-CK、VIMENTIN、CD29、K19)染色，觀察細(xì)胞