白介素-1導(dǎo)致糖皮質(zhì)激素抵抗及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的初步研究.pdf

1、[背景]自身免疫性疾病(AID)發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，自身反應(yīng)性T細(xì)胞、B細(xì)胞的激活，是AID過(guò)程中一個(gè)重要環(huán)節(jié)，表現(xiàn)為細(xì)胞因子(Cytokine,CK)分泌紊亂和自身抗體的增加。其中，白介素-1(IL-1)是一種多功能細(xì)胞因子，是AID的重要參與者，與多種病理過(guò)程有關(guān)，具有促免疫和促炎癥特性。在生理狀態(tài)下，體內(nèi)只有少數(shù)的細(xì)胞表達(dá)IL-1mRNA，但是在感染、炎性因子刺激下，絕大多數(shù)的細(xì)胞均可以表達(dá)，主要有單核/巨噬細(xì)胞，淋巴細(xì)胞等。

2、糖皮質(zhì)激素(GC)是AID的主要治療藥物之一，外源性的GC進(jìn)入體內(nèi)必須和糖皮質(zhì)激素受體(GR)結(jié)合后才能發(fā)揮抗炎、抑制免疫的作用。在抗炎過(guò)程中，GC的一個(gè)重要作用就是抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生，從而降低炎癥反應(yīng)中細(xì)胞因子的作用。但是，在臨床治療AID過(guò)程中，部分患者表現(xiàn)出GC治療不敏感甚至無(wú)效。 絲裂素活化蛋白激酶(MAPK)是信號(hào)從細(xì)胞表面轉(zhuǎn)導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi)部的重要傳遞者，包括ERK通路，JNK通路，P38通路等。MAPK家族參與了細(xì)胞生長(zhǎng)

3、、發(fā)育、分裂及細(xì)胞間功能的同步等多種生理過(guò)程，并在細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化等病理過(guò)程中起重要作用。細(xì)胞外刺激，如：應(yīng)激，細(xì)胞因子(IL-1，TNF-α等)可以激活JNK通路或者P38通路。ERK通路也可能與炎癥反應(yīng)有關(guān)，但是其激活物為生長(zhǎng)因子等。有研究表明IL-1引起的GR的表達(dá)減少和P38通路有關(guān)。那么，此過(guò)程中是否只有P38通路這一條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用?ERK通路和JNK通路是否也在此過(guò)程中發(fā)揮作用?多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之間是否存在協(xié)同作用?目前的

4、研究還沒有明確的報(bào)道。所以，在本研究中，從細(xì)胞水平探討IL-1β對(duì)GR影響，通過(guò)使用3種細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的特異性阻滯劑預(yù)先處理體外分離的單核細(xì)胞，分別阻斷：P38通路、JNK通路、ERK通路，再用IL-1β刺激預(yù)處理的單核細(xì)胞，采用半定量RT-PCR方法檢測(cè)其GR表達(dá)的改變，以期探討其可能的機(jī)制。為闡明糖皮質(zhì)激素抵抗的發(fā)病機(jī)制提供部分實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 [目的] 1、通過(guò)免疫組化的方法定性研究體外分離的單核細(xì)胞在IL-1β刺激前

5、后GR表達(dá)的變化。 2、通過(guò)使用IL-1β刺激體外分離的單核細(xì)胞，采用半定量RT-PCR的方法檢測(cè)刺激前后GR表達(dá)的改變。預(yù)先應(yīng)用特異性細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路阻滯劑分別阻斷體外分離得到的單核細(xì)胞P38通路、JNK通路、ERK通路，檢測(cè)IL-1β刺激后單核細(xì)-Ⅱ-胞GR表達(dá)的改變，以探討介導(dǎo)此過(guò)程中可能的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。 [結(jié)論] 1、IL-1β可以導(dǎo)致體外分離的單核細(xì)胞GR表達(dá)的減少，推測(cè)IL-1β的這種作用可能是引