旋毛蟲感染誘導(dǎo)的Th免疫偏移對(duì)小鼠膠原性關(guān)節(jié)炎的影響.pdf

1、背景：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis, RA)是一種常見的慢性自身免疫性疾病，具有高發(fā)病率和高致殘率，尚無有效的治愈方案，目前的治療手段主要是以減少病人痛苦程度以及減緩疾病進(jìn)程的對(duì)癥治療。目前認(rèn)為RA是由于Th1/Th2和Th17/Treg免疫失衡導(dǎo)致自身免疫系統(tǒng)紊亂所致，糾正免疫失衡可以治療或預(yù)防RA。近年來的研究發(fā)現(xiàn)：旋毛蟲感染能激發(fā)宿主強(qiáng)烈的Th2優(yōu)勢(shì)免疫應(yīng)答，引起Th1/Th2平衡軸向Th2偏移，從而降低

2、部分Th1介導(dǎo)的自身免疫性疾病的發(fā)生和發(fā)展以及病理損傷。但對(duì)RA有無作用尚未見研究報(bào)道，我們推測(cè)旋毛蟲感染也可能通過免疫調(diào)節(jié)對(duì)RA也起到一定的作用。
　　目的：⑴觀察旋毛蟲感染對(duì)CIA模型小鼠的疾病發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程的影響。⑵探討旋毛蟲感染對(duì)CIA模型小鼠的可能的免疫調(diào)控機(jī)制。
　　方法：①通過CⅡ乳劑來誘導(dǎo)DBA-1小鼠關(guān)節(jié)炎發(fā)病，建立小鼠膠原性關(guān)節(jié)炎（CIA）模型，SPF級(jí)環(huán)境下飼養(yǎng)。旋毛蟲肌幼蟲（300條/只）分別于CIA

3、造模前2W、造模同時(shí)、造模后2W經(jīng)口灌胃感染小鼠。②觀察小鼠關(guān)節(jié)炎的發(fā)病情況，并進(jìn)行臨床觀察指標(biāo)觀察，評(píng)分，判斷旋毛蟲不同時(shí)期感染對(duì)CIA小鼠的影響。③CⅡ免疫6W后處死小鼠，剪取小鼠足爪和膝關(guān)節(jié)部位進(jìn)行病理切片，HE染色觀察其不同組間病理損傷程度的差異。④ELISA法檢測(cè)小鼠血清CⅡ膠原特異IgG及其亞類抗體IgG1、IgG2a水平。⑤3H-TdR摻入法檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)。⑥流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠脾淋巴細(xì)胞中Th1、Th2、Th17、

4、Treg細(xì)胞亞群比例。
　　結(jié)果：⑴與正常小鼠對(duì)照組相比，CIA模型組小鼠足爪部位明顯紅腫，并影響小鼠活動(dòng)度，證明CIA模型的成功建立。㈡與CIA模型對(duì)照組相比較，CIA造模前2W感染旋毛蟲組，a：能顯著減輕CIA小鼠關(guān)節(jié)炎的病情，減輕病理損傷。b:血清中CⅡ膠原特異性IgG、IgG2a水平顯著降低，IgG1水平升高。c：脾淋巴細(xì)胞對(duì)ConA多克隆刺激及CⅡ抗原特異性刺激誘發(fā)的增值反應(yīng)明顯降低。CIA造模同時(shí)感染旋毛蟲組對(duì)病情和發(fā)

5、病率，脾淋巴細(xì)胞增殖以及血清CⅡ膠原IgG及其亞類未有明顯影響。CIA造模后2W感染旋毛蟲組則加重了關(guān)節(jié)炎病情及病理損傷，對(duì)脾淋巴細(xì)胞增殖和血清CⅡ膠原IgG及其亞類未有明顯影響。㈢與CIA模型對(duì)照組相比，CIA造模前2W感染旋毛蟲組Th1和Th17細(xì)胞亞群比例顯著降低， Th2和Treg細(xì)胞亞群比例顯著升高。CIA造模同時(shí)感染旋毛蟲組及CIA造模后2W感染旋毛蟲組的Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞亞群比例較CIA模型對(duì)照組無顯著