C1QBP在單核-巨噬細(xì)胞趨化運(yùn)動中的作用.pdf

1、分類號：R3292密級：學(xué)位類別：科學(xué)學(xué)位團(tuán)專業(yè)學(xué)位口學(xué)校代碼：10062學(xué)號：2011602568學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)又坪眚科鼻普Tl羹N羽麓麓蠢Dl眥0Nn丹l嘲1ry碩士學(xué)位論文M【ASTER’SDISSERTATloN論文題目：ClQBP在單核／巨噬細(xì)胞趨化運(yùn)動中的作用TITLETheroleofCIQBPinchemotaxisofmonocytes／macrophages一級學(xué)科：臨床醫(yī)學(xué)二級學(xué)科：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)論文作者：苑博指導(dǎo)

2、教師：劉運(yùn)德導(dǎo)師組成員：岳丹張寧天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一四年五月中文摘要目的：單核／巨噬細(xì)胞的趨化運(yùn)動是機(jī)體免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、腫瘤轉(zhuǎn)移的重要環(huán)節(jié)。我們之前的研究已表明PKⅨ是調(diào)節(jié)單核／巨噬細(xì)胞趨化運(yùn)動的關(guān)鍵分子。在對PKC(進(jìn)行蛋白組學(xué)研究時，采用質(zhì)譜分析的方法篩選并鑒定了一個PKC(的新結(jié)合分子C1QBP。我們前期研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用小RNA干擾技術(shù)C1QBP沉默可以抑制CSF1誘導(dǎo)的單核／巨噬細(xì)胞的趨化運(yùn)動。由此提出：C1QBP可能通過

3、調(diào)控PKC‘的活性來調(diào)節(jié)單核／巨噬細(xì)胞的趨化運(yùn)動。本研究擬建立C1QBP低表達(dá)細(xì)胞株，探討其對單核／巨噬細(xì)胞遷移、黏附能力的影響，初步明確C1QBP在單核／巨噬細(xì)胞趨化運(yùn)動中的作用機(jī)制。本研究初步闡明了C1QBP通過PKc‘調(diào)控單核／巨噬細(xì)胞趨化運(yùn)動的作用機(jī)理，對深入探討炎癥性疾病的發(fā)病機(jī)制和探索防治腫瘤的新措施具有重要意義。方法：1用免疫共沉淀的方法檢測PKc‘與C1QBP的相互作用。2用免疫熒光的方法檢測C1QBP與PKq在細(xì)胞中的

4、定位情況。3應(yīng)用Stealm，蹦RNA降低單核／巨噬細(xì)胞中C1QBP蛋白的表達(dá)水平，用WesternBlotting驗(yàn)證其表達(dá)。4應(yīng)用慢病毒載體介導(dǎo)的RNA干擾技術(shù)構(gòu)建C1QBP穩(wěn)定降表達(dá)的小鼠單核／巨噬細(xì)胞RAW2647細(xì)胞系，用WesternBlotting驗(yàn)證其表達(dá)。5用趨化運(yùn)動實(shí)驗(yàn)和肌動蛋白聚合實(shí)驗(yàn)檢測C1QBP降表達(dá)對人單核／巨噬細(xì)胞THP1細(xì)胞系的運(yùn)動能力的影響。6用趨化運(yùn)動實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)檢測C1QBP降表達(dá)對Clq、C