BAG-1基因表達(dá)與EGFR表達(dá)的相關(guān)性分析及對(duì)乳腺癌靶向治療的影響.pdf

1、目的：
　　乳腺癌是一類(lèi)在分子水平上具有高度異質(zhì)性的惡性腫瘤，在靶向治療中尚存在一定的耐藥性，目前凋亡障礙及其機(jī)制成為研究的一個(gè)熱點(diǎn)。本文研究抗凋亡基因BAG-1(Bc1-2 associated athanogene-1)在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)，分析其與表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)的相關(guān)性，探討B(tài)AG-1表達(dá)對(duì)乳腺癌靶向治療敏感性及耐受性的影響。
　　方法：<

2、br>　　培養(yǎng)EGFR(+)、(-)的乳腺癌細(xì)胞株T47D、MDA-MB-231、MCF-7及SKBR3細(xì)胞，通過(guò)RT-PCR及real-time PCR技術(shù)檢測(cè)不同細(xì)胞株中BAG-1 mRNA的表達(dá)，并通過(guò)Western blot方法檢測(cè)其蛋白水平的表達(dá)。對(duì)EGFR(+)BAG-1高表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞株，應(yīng)用SiRNA技術(shù)降低BAG-1的表達(dá)，并分別應(yīng)用real-timePCR和Western blot方法檢測(cè)BAG-1與EGFR在mR

3、NA和蛋白水平的表達(dá)變化。應(yīng)用MTT方法檢測(cè)BAG-1降表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞對(duì)EGFR抑制劑吉非替尼的藥物反應(yīng)性。
　　結(jié)果：
　　1.在EGFR(+)的乳腺癌細(xì)胞株T47D細(xì)胞和MDA-MB-231細(xì)胞中BAG-1基因表達(dá)高于EGFR(-)的乳腺癌細(xì)胞株MCF-7細(xì)胞和SKBR3細(xì)胞(P<0.05)，其中T47D細(xì)胞BAG-1基因表達(dá)水平最高。
　　2.篩選有效的SiRNA序列BAG-1 SiRNA1轉(zhuǎn)染T47D細(xì)胞，在

4、BAG-1 SiRNA50nM轉(zhuǎn)染48h后，轉(zhuǎn)染組BAG-1 mRNA降至對(duì)照組的36.9％(P<0.05)，而轉(zhuǎn)染組的EGFR基因表達(dá)較對(duì)照組升高約1.56倍(P<0.05)。
　　3.應(yīng)用不同濃度梯度的吉非替尼處理BAG-1降表達(dá)前后的乳腺癌細(xì)胞，隨著吉非替尼濃度的升高，細(xì)胞的抑制率亦逐漸升高，BAG-1降表達(dá)組的細(xì)胞抑制率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.在乳腺癌細(xì)胞中，BAG-1與EGFR之