隔絕淋巴引流在同種異體復(fù)合組織移植中的作用及作用機(jī)制研究.pdf

1、研究背景：在器官移植取得成功后的50年里,復(fù)合組織移植進(jìn)展一直十分緩慢,導(dǎo)致這一現(xiàn)象的原因被歸結(jié)為皮膚的強(qiáng)抗原性和缺少有效的免疫抑制手段,成為了復(fù)合組織移植不可逾越的障礙。隨著新型免疫抑制劑的發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用以及顯微外科技術(shù)的成熟,同種異體復(fù)合組織移植在整形與重建外科領(lǐng)域近年來獲得了突破,但是限制其發(fā)展的瓶頸仍舊是免疫抑制劑全身長期應(yīng)用所帶來的毒副作用[1,2],如何減少免疫抑制劑全身用藥劑量是目前該領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。在異體皮膚及角膜的移植研究

2、中發(fā)現(xiàn)引流淋巴結(jié)對于排斥反應(yīng)至關(guān)重要,對切除引流淋巴結(jié)的豚鼠進(jìn)行相應(yīng)引流部位的異體皮膚移植后,異體皮膚存活時間延長[3],角膜的Langerhans等骨髓來源的細(xì)胞[4,5]在移植后,可以遷移至局部引流淋巴結(jié),提呈角膜的異體抗原,引發(fā)免疫排斥反應(yīng)[6],因此阻斷復(fù)合組織移植物皮膚淋巴管網(wǎng)與受體相接觸,一方面能有效的切斷抗原提呈細(xì)胞和活化T細(xì)胞通過淋巴管輸入引流淋巴結(jié)中,另一方面也阻斷了受體效應(yīng)T細(xì)胞通過淋巴管進(jìn)入移植物中,從而可以延長移

3、植物的存活時間。本實(shí)驗(yàn)試圖建立大鼠下腹部異體復(fù)合組織淋巴引流隔絕模型,并嘗試延長移植物的存活時間。
　　目的：1.建立隔絕淋巴引流的大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?.驗(yàn)證淋巴引流是否是啟動免疫排斥的主要途徑。
　　方法：實(shí)驗(yàn)一(1)大鼠腹股溝部解剖,熟悉局部解剖結(jié)構(gòu)(2)通過對比橡皮墊隔離模型、塑料管隔離模型、塑料托盤加鐵絲網(wǎng)固定模型的優(yōu)缺點(diǎn)確定實(shí)驗(yàn)隔離模型。實(shí)驗(yàn)二(1)利用實(shí)驗(yàn)一確定的游離移植皮瓣和隔絕淋巴引流的大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ屯ㄟ^顯微外科血管

4、吻合進(jìn)行大鼠的自體游離皮瓣移植,移植皮瓣分為三組,分別為游離皮瓣組(供區(qū)皮瓣直接與受區(qū)縫合無隔離)、皮管組(將供體皮瓣卷制為管狀與受區(qū)縫合)、隔離組(實(shí)驗(yàn)一建立大鼠隔離模型)。術(shù)后觀察皮瓣血供情況,摸索術(shù)后固定及取材方法。(2)通過SD大鼠異體游離皮瓣及皮管的移植,建立大鼠復(fù)合組織移植淋巴引流隔絕模型。7-8周齡雄性SD大鼠切取下腹部皮瓣并游離行同種異體移植,皮膚淋巴隔離組(A組):將供體皮瓣邊緣對合、縫合成管狀,底邊留血管蒂出口用隔離

5、器隔離,顯微外科吻合血管,皮管縫合于隔離器,隔離器固定于受體;單純皮管組(B組):將供體游離皮瓣卷制成管狀,顯微外科吻合血管并將皮管直接縫合于受體;C組空白對照組(C組):行游離皮瓣異體移植,大體觀察每組皮瓣及皮管存活時間,于術(shù)后3、5、7、14、28、35d取移植物皮膚組織行HE染色,觀察病理學(xué)變化。結(jié)果實(shí)驗(yàn)一經(jīng)對大鼠背部皮瓣、顏面部皮瓣、下腹部皮瓣及側(cè)胸皮瓣的解剖和移植對比,下腹部皮瓣具有解剖結(jié)構(gòu)清楚、供應(yīng)血管適合顯微縫合、術(shù)后觀察

6、及取材較為簡便等優(yōu)點(diǎn),故選為本實(shí)驗(yàn)移植皮瓣。通過對橡皮墊隔離、塑料管隔離和塑料托盤加鐵絲網(wǎng)固定三種隔離模型的對比,塑料托盤加鐵絲網(wǎng)固定模型在術(shù)后固定及隔離效果方面明顯優(yōu)于其他兩種模型,故選為實(shí)驗(yàn)隔離模型。實(shí)驗(yàn)二三組不同移植形式的大鼠自體下腹部游離皮瓣均滿意成活,隔絕淋巴引流的大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒⒊晒?。SD大鼠異體皮瓣移植A組(隔離組):皮管存活時間為32(34,32)天;B組(皮管組):皮管存活時間為15(16,15)天;C組(對照組):皮