P14KA與乙型肝炎病毒復(fù)制的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:通過探討PI4KA與慢性乙型肝炎患者病毒載量的關(guān)系;觀察PI4KA在肝癌細(xì)胞株HepG2及HepG2.2.15中表達(dá)的差異，探究HBV對(duì)PI4KA表達(dá)的影響;在臨床和細(xì)胞水平探討PI4KA與乙型肝炎病毒復(fù)制的關(guān)系。
　　方法:收集180例慢性乙型肝炎患者的血清，利用熒光定量PCR檢測其HBV DNA的載量，根據(jù)其HBV DNA載量的高低，分為三組:高病毒載量組(HBV DNA＞1×107拷貝/ml)、中病毒載量組（1×105

2、拷貝/ml≤HBV DNA≤1×107拷貝/ml）及低病毒載量組(HBV DNA＜1×105拷貝/ml)，同時(shí)以60名健康人作對(duì)照。采用ELISA法，檢測各組外周血清中的PI4KA的含量;培養(yǎng)HepG2及HepG2.2.15細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融合達(dá)到90％時(shí)，提取兩細(xì)胞RNA并逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測HepG2和HepG2.2.15細(xì)胞中PI4KA mRNA的表達(dá)水平;采用ELISA法檢測此兩種細(xì)胞培養(yǎng)上清液中PI4KA

3、的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:60例健康人血清PI4KA的含量為2.29±0.75ng/ml;60例低病毒載量組血清PI4KA的含量為2.73±0.71ng/ml;60例中病毒載量組血清PI4KA的含量為3.52±0.78ng/ml及60例高病毒載量組血清PI4KA含量為4.72±0.77ng/ml。慢性乙型肝炎患者不同病毒載量組與健康對(duì)照組間血清PI4KA的含量差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=119.958，P＜0.01)，并且不同病毒載量

4、組都顯著高于對(duì)照組。隨著HBV DNA載量的升高，PI4KA的含量增加，兩者呈正相關(guān)(r=0.758，P＜0.01); HepG2.2.15細(xì)胞中PI4KA mRNA的表達(dá)水平較HepG2高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中，HepG2和HepG2.2.15細(xì)胞PI4KA的含量分別為1.07±0.54ng/ml和1.63±0.43ng/ml，HepG2.2.15細(xì)胞中PI4KA的含量高于HepG2細(xì)胞(t=2.29，