控制性低中心靜脈壓對兔肝缺血再灌注損傷的肝腎保護實驗研究.pdf

1、目的：比較控制性低中心靜脈壓(controlled low central venouspressure,CLCVP)在生理和肝缺血再灌注損傷(ischemia reperfusioninjury,IRI)狀態(tài)下酸堿平衡、凝血功能及肝腎血流和功能的變化,揭示CLCVP對肝腎灌注的影響。
　　 方法：健康成年新西蘭大白兔32只,雌雄不拘,體重2.02±0.07kg,隨機分為4組(各組n=8):對照組(C組)、單純CLCVP組(L組

2、)、肝IRI組(IR組)和CLCVP下肝IRI組(LIR組)。各組動物均經(jīng)耳緣靜脈注射3％戊巴比妥鈉30 mg/kg麻醉,仰臥固定。氣管切開插管機械通氣,左頸總動脈監(jiān)測血壓,右頸內(nèi)靜脈監(jiān)測中心靜脈壓(central venous pressure,CVP)。L組和LIR組經(jīng)右股靜脈微量泵入硝酸甘油10～30μg·kg-1·min-1(3.6 mg/ml)、多巴胺30～40μg·kg-1·min-1(4.8mg/ml),在5 min內(nèi)使C

3、VP降至4～5 cmH2O,并控制平均動脈壓(meanarterial blood pressure,MAP)≥80 mmHg建立CLCVP模型。C組和IR組靜脈泵入等量生理鹽水。然后IR組和LIR組建立IRI模型:兔右肋下1.5cm處行橫切口進腹,分離第一肝門,用無創(chuàng)動脈夾夾閉門靜脈、肝動脈和膽總管,0.5 h后開放肝門再灌注。又于麻醉后5 min(T0)、CLCVP模型建立成功(肝門開放)即刻(T1)、0.5 h(T2)、1h(T3

4、)、2 h(T4)、4 h(T5)、6 h(T6)時點,彩色超聲監(jiān)測各組肝腎血管內(nèi)徑、動脈收縮期峰值流速(peak systolic blood flow velocity,Vs)、舒張末期流速(end diastolic blood flow velocity,Ved)、平均血流速度(mean-envelped blood flow velocity,Vm)、阻力指數(shù)(resistance index,RI)、搏動指數(shù)(pulsati

5、lity index,PI)以及靜脈血流速度,采集動脈血檢測血氣分析、乳酸(lactic acid,LD)、凝血酶原時間(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶時間(activated partial thromboplastin time,APTT)、谷丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine transaminase,ALT)、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate transaminase,AST)、肌酐(creati

6、nilie,Cr),并在T6時點測定尿量。電鏡觀察肝腎組織超微結(jié)構(gòu)變化。
　　 結(jié)果：(1)血氣分析和凝血功能:與C組比,L組各時點血氣分析、LD、PT、APTT差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),IR組和LIR組T2～5時點pH降低(P<0.05),IR組和LIR組T1～6時點LD增高(P<0.05)。LIR組T1～5時點LD較IR組降低(P<0.05)。與C組比,IR組T1～6時點和LIR組T3～5時點PT延長,兩組T1～6時

7、點APTT延長(P<0.05)。LIR組T1～6時點PT和T1～5時點APTT較IR組縮短(P<0.05)。(2)肝灌注和肝功能:與C組比,L組各時點肝血管內(nèi)徑、血流速度、ALT、AST差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),IR組和LIR組各時點肝血管內(nèi)徑、肝門靜脈血流速度差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。IR組T1～6時點和LIR組T2～4,6時點肝動脈Vm較C組減慢(P<0.05)；LIR組T1～2,5時點較IR組增快,且T3時點較T1

8、時點減慢(P<0.05)。IR組T1～5時點和LIR組T1～2時點肝動脈RI和PI較C組升高(P<0.05)；LIR組T1,3～時點肝動脈RI和PI較IR組降低(P<0.05)。LIR組T1～6時點肝靜脈流速較C組和IR組增快(P<0.05)。IR組和LIR組T1～6時點ALT、AST較C組增高(P<0.05)；LIR組T1,4～6時點ALT較IR組降低,且T2～5時點較T1時點增高；LIR組T1～6時點AST較IR組降低,其中T3～4

9、時點較T1時點增高(P<0.05)。(3)腎灌注和腎功能:與C組比,L組各時點腎血管內(nèi)徑、血流速度、Cr差異無統(tǒng)計學意義,IR組和LIR組各時點腎動脈內(nèi)徑差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。IR組T1～4時點腎動脈Vm較C組減慢(P<0.05)；LAR組T1～4時點腎動脈Vm較IR組增快(P<0.05)。IR組T1～4時點和LIR組T4時點腎動脈RI較C組升高(P<0.05)；IAR組T2時點腎動脈RI較IR組降低(P<0.05)。IR組

10、T1～4時點腎靜脈流速較C組減慢,LIR組T1～4時點腎靜脈流速較IR組增快(P<0.05)。IR組T1～6時點Cr較C組增高(P<0.05)；LIR組T1～6時點Cr較IR組降低,其中T4～5時點較T1時點增高(P<0.05)。IR組和LIR組尿量較C組減少,LIR組較IR組增加(P<0.05)。(4)肝腎組織超微結(jié)構(gòu):IR組肝細胞線粒體明顯腫脹、嵴斷裂,滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增生明顯,竇周間隙面微絨毛明顯腫脹,部分呈空泡狀,有脫落入肝血竇腔內(nèi),

11、肝血竇內(nèi)皮細胞腫脹壞死,竇壁破壞明顯,肝血竇腔內(nèi)可見中性粒細胞、淋巴細胞浸潤；腎小球毛細血管擴大,足細胞足突有不同程度的融合或消失。LIR組肝細胞線粒體稍有腫脹,無嵴斷裂,滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增生,竇周間隙面微絨毛稍有腫脹,肝血竇內(nèi)皮細胞稍有腫脹,竇壁覆蓋完整；腎小球毛細血管稍有擴大,未見足突融合。
　　 結(jié)論：(1)在生理狀態(tài)下CLCVP在6 h內(nèi)對機體酸堿平衡、凝血功能以及肝腎功能無明顯影響。(2)肝IRI可導(dǎo)致機體代謝性酸中毒、凝血