脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染survivin反義寡核苷酸對人胰腺癌細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、廣西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染survivin反義寡核苷酸對人胰腺癌細(xì)胞凋亡的影響姓名：劉海威申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：普通外科指導(dǎo)教師：劉志明200905013轉(zhuǎn)染所用的脂質(zhì)體量2u1、3ul、4u1時，熒光細(xì)胞百分率分別為588％、34O％和236％；4SurvivinASODN轉(zhuǎn)染后熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染后細(xì)胞排列松散，細(xì)胞之間空隙加大，形態(tài)變圓，胞漿中顆粒較多，貼壁細(xì)胞生長較少，部分漂浮于培養(yǎng)液中，培養(yǎng)液因此變得較混濁，且隨著轉(zhuǎn)染

2、濃度的增加變化更明顯；5MTT法結(jié)果顯示：200noml／L的ASODN作用于胰腺癌PANC—l細(xì)胞24h、36h、48h后細(xì)胞抑制率分別為3067％、4267％、613％，隨著時間延長，細(xì)胞抑制率增高，分別作用24、36、48d時后各對照組之間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(尸005)；6DNA凝膠電泳觀察：在電泳圖上呈明顯的“梯狀”條帶，而正義組、脂質(zhì)體空轉(zhuǎn)染組和空白對照組則沒有；7吖叮橙(AO)與溴化乙啶(EB)染色觀察PANC一1細(xì)胞凋亡的形態(tài)

3、學(xué)改變：細(xì)胞凋亡時，細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見致密濃染的黃綠色染色，其核染色質(zhì)均高度聚集、斷裂或核染色呈新月形聚集于核膜一邊，核固縮與斷裂，核仁消失；細(xì)胞壞死時，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)黃綠色或桔黃色熒光均可減弱或消失，紅色熒光增強(qiáng)；8survivinASODN處理組PANC一1細(xì)胞24h后凋亡率為381％，正義寡核苷酸(SODN)組為416％。細(xì)胞周期阻滯于G：／M期；9采用免疫組織化學(xué)和圖像分析半定量法，觀察轉(zhuǎn)染后各組survivin蛋白表達(dá)的平均灰度值