復(fù)方菝葜顆粒對NSCLC A549細胞p53mRNA及細胞周期、凋亡率影響的研究.pdf

1、目的：通過含藥血清實驗，研究復(fù)方菝葜顆粒對肺癌NSCLC A549細胞P53mRNA及細胞周期、凋亡率的影響，探討復(fù)方菝葜顆粒治療肺癌的部分作用機制。 方法： 1．分組：將NSCLC A549細胞隨機分為中藥實驗組、西藥對照組和正常對照組。中藥實驗組用10％的含藥血清培養(yǎng)肺癌細胞；西藥對照組用3μg／ml的順鉑培養(yǎng)；正常對照組用10％的正常大鼠血清培養(yǎng)。 2．實驗部分：①大鼠血清提取：雄性SD大鼠30只隨機分為藥

2、物血清組(中藥組)、正常血清組(對照組)，每組15只。中藥組予以復(fù)方菝葜顆粒喂服，對照組給予相同劑量的蒸餾水。給藥6次，末次給藥后2h無菌條件下自左心室取得中藥組血清及對照組血清，滅活、除菌。②細胞培養(yǎng)：分別在細胞培養(yǎng)的Oh，24h，48h和72h進行細胞計數(shù)，繪制細胞生長曲線，觀察各組細胞生長狀況。③流式細胞技術(shù)和RT-PCR檢測：細胞培養(yǎng)48小時后制成單細胞懸液，流式細胞技術(shù)檢測NSCLC細胞的細胞周期及凋亡率；半定量RT-PCR檢

3、測細胞中抑癌基因P53mRNA的表達。 結(jié)果： 1．細胞培養(yǎng)24小時后，中藥實驗組、西藥對照組和正常對照組三組的細胞數(shù)無明顯差異。培養(yǎng)48h后，三組細胞數(shù)均有所增加，中藥實驗組和西藥對照組兩組細胞數(shù)比較無明顯差異；但明顯少于正常對照組，與之相比有顯著性差異。 2．培養(yǎng)48小時后，中藥實驗組和西藥對照組G<,1>細胞數(shù)、凋亡率明顯高于正常對照組相，與之相比有顯著性差異。中藥實驗組與西藥對照組各期細胞數(shù)、凋亡率無明顯