干細胞治療急性腎臟缺血的研究.pdf

1、腎功能衰竭是住院患者致死率高的一種疾病。急性缺血性腎損傷被認為可導致急性腎功能衰竭，急性腎功能衰竭可進一步導致慢性腎臟疾病的發(fā)作和腎功能衰竭。長期的缺血性內皮細胞功能障礙和微血管損傷造成腎臟功能失靈。在過去的十年中，大量的研究工作都集中在對組織損傷的細胞療法的發(fā)展，包括自體移植成體干細胞、骨髓和外周血來源的內皮祖細胞(EPCs)、人類內皮細胞與平滑肌祖細胞或間充質干細胞(MSCs)的共移植等。
　　內皮細胞治療可改善血管再生，尤其

2、是促進功能性微脈管系統(tǒng)的再生，被認為是一個很有潛力的治療方案。然而，還未有研究直接檢查內皮細胞治療對腎復蘇的影響作用。本論文第一部分主要探討內皮細胞在小鼠急性腎損傷模型中的療效。首先將人類胚胎干細胞中提取的內皮細胞(hESC-ECs)用一個熒光素酶和綠色熒光蛋白(GFP)共同編碼的雙融合報告基因標記。培養(yǎng)的hESC-ECs(1×106)被注射到急性缺血/再灌注腎，通過活體成像技術監(jiān)控體內hESC-ECs從移植后的第1天到第14天的生存情

3、況。通過組織學分析評估內皮細胞移植對hESC-EC治療腎再生潛在的影響。我們發(fā)現(xiàn)hESC-EC注入24小時內可見穩(wěn)定的生物熒光活動，但隨著時間推移熒光信號逐漸減弱。通過計數(shù)BrdU+細胞數(shù)發(fā)現(xiàn)hESC-ECs顯著加速缺血損傷區(qū)的腎細胞增殖。Sca-1(腎臟干細胞標記)和BrdU的共表達染色發(fā)現(xiàn)hESC-EC治療腎再生潛在的影響部分要歸功于增加腎干細胞的增殖。hESC-ECs在注射入動物體內的早期階段可分化平滑肌細胞?？傊?，我們的結果表明

4、，內皮細胞療法通過促進血管化、轉分化和內生腎干細胞的增殖促進腎功能恢復。
　　骨髓(BM)干細胞已有報告稱有助于腎損傷模型后的組織修復。然而，到目前為止沒有直接證據(jù)表明骨髓細胞可以轉分化為腎干細胞。為了調查骨髓干細胞是否有助于腎干細胞池的重新補充，在本文的第二部分我們移植表達增強型綠色熒光蛋白轉基因小鼠的骨髓細胞到受到輻射損傷的受體中。受體動物骨髓再造和缺血/再灌注損傷后，通過免疫染色和流式細胞術評價Sca-1+和c-Kit+腎干