99mTc-tetrofosmin腫瘤顯像早期評價鼻咽癌放化療療效.pdf

1、第一部分99mTc-tetrofosmin SPECT腫瘤斷層顯像評價鼻咽癌治療療效的研究
　　目的：通過對鼻咽癌患者治療不同時期的99mTc-tetrofosmin(TF)SPECT斷層顯像，觀察99mTc-TF對鼻咽癌的檢出能力，并通過觀察其在鼻咽癌放化療后不同時期在腫瘤部位的濃聚情況，研究其評價鼻咽癌治療效果的能力及時機，從而為臨床上用99mTc-TF診斷鼻咽癌及觀察其放化療療效提供研究基礎(chǔ)。
　　方法：1.鹽城市第一

2、人民醫(yī)院收治的鼻咽癌患者20例，全部患者均經(jīng)病理證實為鼻咽癌，行99mTc-TF SPECT斷層顯像。同期在本院行心肌灌注顯像的5例患者作為對照組。2.患者分別在治療前及治療初期（<11.5Gy）、治療中期（初期顯像后放療5次以上）及治療后（放療總劑量>66Gy）行99mTc-TF SPECT顯像；3.計算早期顯像的T/N比值作為99mTc-TF顯像攝取指數(shù)（MUI），利用2小時延遲顯像獲得99Tcm-TF延遲顯像攝取指數(shù)（DUI），同

3、時計算滯留率（RI）。RI=（DUI-MUI）/MUI×100％。以接受器工作特性曲線（ROC）分析確定MUI判別閾值，評價99mTc-TF SPECT對鼻咽癌早期放化療療效評估的價值。4.實驗結(jié)果均采用均數(shù)±標準差（x±S)表示，數(shù)據(jù)分析采用SPSS19.0軟件，進行單因素方差分析(ANOVA)或者t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：1.20例患者中11例患者為治療前患者，9例患者為治療初期患者。11例治療前患者

4、的MUI為8.74±2.43，而9例治療初期患者的MUI為6.78±3.17，兩者之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；11例治療前患者的DUI為10.41±2.36，9例治療初期患者的DUI為8.39±3.49，兩者之間差異也無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。20例鼻咽癌患者治療前及治療初期MUI為7.86±2.89，DUI為9.50±3.02，延遲顯像攝取指數(shù)明顯上升，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。早期顯像病灶部位與對側(cè)鼻咽部比值為

5、1.57±0.27，對照組早期顯像兩側(cè)鼻咽部比值為1.14±0.09，兩組之間差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；延遲顯像病灶部位與對側(cè)鼻咽部比值為1.66±0.25，較早期顯像增高，兩組之間差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。2.18例鼻咽癌患者治療中期SPECT顯像MUI為5.92±1.55，DUI為7.29±2.11。18例早期及延遲皆顯像的鼻咽癌患者延遲顯像攝取指數(shù)較早期顯像明顯上升，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。18例治療中期

6、患者的早期顯像MUI較治療前降低，兩組之間差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；19例治療中期患者的延遲顯像DUI較治療初期也明顯降低，兩組之間差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。3.18例鼻咽癌患者治療結(jié)束SPECT顯像MUI為5.01±1.95，DUI為6.11±2.70，延遲顯像較早期顯像攝取指數(shù)明顯上升，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。MUI和DUI與治療初期顯像比較，明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；與治療中期顯像比較，

7、差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。17例早、中、晚期皆行早期及延遲顯像的患者治療不同時期滯留指數(shù)分別為0.22±0.05、0.19±0.07及0.19±0.08，三者之間差異無統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)論：鼻咽腫瘤部位出現(xiàn)較對側(cè)及腦部增高的放射性攝取，隨著時間的延長，腫瘤部位攝取也增加；治療中期顯像示腫瘤部位放射性攝取較治療前及治療早期降低，但與治療后期結(jié)果沒有明顯差異。本研究證實了99mTc–TF可用于鼻咽癌顯像，并可為臨床早期評價鼻

8、咽癌放療療效提供一種新的檢查方法。
　　第二部分99mTc-tetrofosmin細胞結(jié)合早期評價鼻咽癌細胞放療療效的試驗研究
　　目的：通過測定放療前及不同劑量放療后24h的99mTc-TF細胞結(jié)合率，與腫瘤增殖指標比較分析，從細胞學水平驗證99mTc-TF早期觀察鼻咽癌放療療效的可行性。
　　方法：1.用胰酶消化細胞、計數(shù)并接種，培養(yǎng)24h后棄去上清，加入3.7KBq(50μL)99mTc-TF，放置37℃繼續(xù)培養(yǎng)

9、100min，隨后吸去上清液加入上清管；用胰酶消化細胞，收集后加入細胞管；用γ測量儀測量細胞的CPM計數(shù)及上清液CPM計數(shù)，計算99mTc-TF的細胞結(jié)合率。空白實驗管不含細胞，作為非特異性吸附。2.將CNE-1細胞接種在細胞培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)24h后，各組分別給予0、2、4、8 Gy單次照射，24h后測量每瓶細胞99mTc-TF細胞結(jié)合率。3.在四塊96孔板上接種細胞，培養(yǎng)24h至細胞貼壁后，各組分別給予0、2、4、8 Gy單次照射24h

10、后，分別取出96孔板，每孔加入MTT試劑反應(yīng)4h，加150μL DMSO反應(yīng)15min，在酶標分析儀上于492nm波長檢測光密度(OD)值，計算細胞生長抑制率。4.接種細胞培養(yǎng)24h待細胞貼壁后，各組分別給予0、2、4、8 Gy單次照射，再培養(yǎng)24h后消化并收集細胞，用70%的乙醇溶液4℃固定24h，加入500μL的Binding Buffer懸浮細胞，再加入5μL Annexin V-FITC，繼續(xù)加入5μL PI，混勻；室溫避光反應(yīng)

11、15min；用流式細胞儀檢測細胞早期凋亡率。5.實驗數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標準差（x±s)表示，采用SPSS19.0軟件進行完全隨機設(shè)計的單因素方差分析，照射劑量與其他參數(shù)相關(guān)性采用Spearman相關(guān)檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：1.接受不同劑量照射后24h，與對照組相比，照射各組的OD值均出現(xiàn)下降，2、4及8Gy組細胞生長抑制率分別為(7.14±1.86)%、(17.44±2.21)%及(33.54±3.51)%

12、，各組之間差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。細胞生長抑制率隨照射劑量的加大而增加，兩者呈正相關(guān)(r=0.945，P＜0.01)。2.不同劑量射線照射CNE-1細胞后24h，與對照組比較，流式細胞儀測定細胞早期凋亡率明顯增高，各組之間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；細胞早期凋亡率隨著照射劑量的增加而增加，兩者呈正相關(guān)(r=0.969，P＜0.01)。3.不同劑量照射CNE-1細胞24h后，4Gy和8Gy組99mTc-TF細胞結(jié)合率比對

13、照組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；8Gy組99mTc-TF細胞結(jié)合率較2Gy和4Gy組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；99mTc-TF細胞結(jié)合率隨照射劑量的增加而降低，兩者呈負相關(guān)(r=-0.805，P＜0.01)。
　　結(jié)論：CNE-1細胞經(jīng)不同劑量射線照射后24h，細胞生長受到抑制，早期凋亡率和細胞生長抑制率隨照射劑量的增加而增加，99mTc-TF細胞結(jié)合率出現(xiàn)降低，與細胞生長抑制率呈負相關(guān)，從細胞學水平證實