孕期肥胖對子代心功能異常程序化的影響及其機(jī)制研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩87頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、本研究分為二部分:
  第一部分、孕期肥胖對胎鼠心臟結(jié)構(gòu)和心肌細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制研究
  目的:孕期肥胖通過影響AT1R和AT2R的表達(dá)來探討胎鼠心臟結(jié)構(gòu)和心肌細(xì)胞增殖改變的機(jī)制。
  方法:
  在SD雌鼠妊娠期第1~21天給予高脂飲食,建立妊娠期肥胖動物模型。取21天乳鼠心臟進(jìn)行原代心肌細(xì)胞培養(yǎng),利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測心肌細(xì)胞的細(xì)胞周期。透射電鏡觀察21天胎鼠心臟超微結(jié)構(gòu)的變化;Western-blot法檢

2、測心肌組織AT1R和AT2R蛋白表達(dá)的情況; RT-PCR法檢測AT1R和AT2R mRNA的表達(dá)情況;染色質(zhì)免疫沉淀方法和GR抗體提取GR-GRE復(fù)合物進(jìn)行 RT-PCR擴(kuò)增檢測GR與GRE結(jié)合力情況。
  結(jié)果:
  1.與對照組相比,妊娠期第1天,肥胖組的孕鼠體重?zé)o顯著性差異,但在妊娠期第21天,肥胖組的孕鼠體重顯著增加(P<0.05)。
  2.肥胖組和對照組胎鼠的心臟重量與體重沒有統(tǒng)計學(xué)差異,但肥胖組胎鼠心臟

3、體重的比值明顯高于對照組(P<0.05)。
  3.與對照組相比,肥胖組胎鼠心肌細(xì)胞在 G1期細(xì)胞數(shù)量明顯增加,而 S期和G2期,心肌細(xì)胞數(shù)量顯著減少(P<0.05)。
  4.孕期肥胖改變胎鼠心臟超微結(jié)構(gòu),包括肌原纖維排列紊亂,微絲模糊,變小,甚至消失;線粒體腫脹,線粒體嵴部分或全部消失,線粒體呈空泡化。
  5. Western-blot結(jié)果顯示,與對照組相比,肥胖組胎鼠心臟AT1R蛋白表達(dá)水平明顯降低,而AT2R

4、蛋白水平顯著升高(P<0.05)。
  6.RT-PCR結(jié)果顯示,與對照組相比,肥胖組胎鼠心臟AT1aR mRNA水平明顯降低;而AT2R mRNA水平顯著升高(P<0.05)。
  7. Western-blot結(jié)果顯示,與對照組相比,肥胖組胎鼠心臟GR總蛋白、GR核蛋白和GR mRNA水平顯著降低(P<0.05)。
  8. ChIP結(jié)果顯示在孕期肥胖減少AT1R和AT2R啟動子上GRE與GR的結(jié)合。
  小

5、結(jié):
  1.孕期肥胖導(dǎo)致胎鼠心臟超微結(jié)構(gòu)(包括肌原纖維紊亂、線粒體腫脹、線粒體嵴消失甚至空泡化)的改變和心肌細(xì)胞增殖的抑制,這可能與血管緊張素Ⅱ受體的改變有關(guān)。
  2.孕期肥胖降低胎鼠心臟AT1aR和AT2R啟動子上GR與GRE的結(jié)合,導(dǎo)致胎鼠心臟血管緊張素Ⅱ受體的改變。
  第二部分、孕期肥胖對成年子代心功能異常程序化的影響及其機(jī)制研究
  目的:孕期肥胖通過影響AT1R和AT2R的表達(dá)以及對子代大鼠心肌缺

6、血再灌注損傷來探討孕期肥胖導(dǎo)致成年子代鼠心臟功能異常的機(jī)制,并且確定是否存在性別差異。
  方法:
  在SD雌鼠妊娠期第1~21天給予高脂飲食,建立妊娠期肥胖動物模型。出生后,肥胖組和對照組母鼠正常飲食,子代大鼠同等條件下飼養(yǎng)至3個月齡作為實(shí)驗(yàn)用動物。小動物超聲成像系統(tǒng)檢測成年子代大鼠心臟功能;子代大鼠心臟建立langendroff系統(tǒng)檢測大鼠心臟缺血再灌注損傷的敏感性;TTC法測定子代大鼠缺血再灌注后心臟梗死面積;LDH

7、試劑盒測定灌流液中LDH的活性;EIA法測定子代大鼠血清Ang II含量;Western blot法檢測子代大鼠心肌組織AT1R和AT2R蛋白表達(dá)的情況;RT-PCR法檢測AT1R和AT2R mRNA的表達(dá);染色質(zhì)免疫沉淀方法和GR抗體提取 GR-GRE復(fù)合物進(jìn)行 RT-PCR擴(kuò)增檢測GR與GRE結(jié)合力情況。
  結(jié)果:
  1.結(jié)果顯示與對照組相比,肥胖組子代雄性大鼠的體重沒有變化,而心臟重量和心臟體重比值顯著升高(P<0

8、.05),而雌性大鼠體重、心臟重量和心臟體重比值均沒有改變。
  2.超聲結(jié)果顯示在短軸M模式下測量子代大鼠收縮功能,與對照組相比,肥胖組子代雄性大鼠的左心室舒張期前壁厚度(LVAW;d)、左心室收縮期前壁厚度(LVAW;s)、左心室舒張期后壁厚度(LVPW;d)、左心室收縮期后壁厚度(LVPW;s)、左心室射血分?jǐn)?shù) EF(%)和左心室短軸縮短速率 FS(%)均顯著增加,而左室舒張末期內(nèi)徑(LVID;d)、左室收縮末期內(nèi)徑(LVI

9、D;s)明顯減少(P<0.05)。而肥胖組子代雌性大鼠室壁厚度和心室內(nèi)徑均無顯著差異。
  3.在二尖瓣灌流測量模式下測量子代大鼠舒張功能,肥胖組子代雄性大鼠和雌性大鼠的舒張功能均沒有改變。測量的指標(biāo)有MVA, MVE, E/A ratio, DT, IVRT, and ET。
  4.孕期肥胖加重子代雄性大鼠心臟缺血再灌注心功能的損傷、梗死面積和灌流液中LDH的活性(P<0.05)。而子代雌性大鼠心臟則沒有改變。
 

10、 5.孕期肥胖增加子代雄性大鼠血清中AngII的含量(P<0.05),而雌性大鼠則沒有變化。孕期肥胖增加子代雄性大鼠心臟 AT2R蛋白和mRNA的表達(dá)(P<0.05),而雌性大鼠心臟則沒有改變。然而,孕期肥胖對子代雄性和雌性大鼠心臟AT1R的表達(dá)沒有任何影響。
  6.拮抗AT2R的表達(dá)可以逆轉(zhuǎn)孕期肥胖增加子代雄性大鼠心肌缺血再灌注損傷敏感性。
  7.孕期肥胖降低子代雄性大鼠心臟AT2R啟動子上GR與GRE的結(jié)合,這是由于

11、雄性大鼠心臟GR核蛋白量的減少和結(jié)合力的降低導(dǎo)致的。
  小結(jié):
  1.孕期肥胖沒有改變子代心臟收縮和舒張功能,但發(fā)現(xiàn)子代有心肌肥厚的傾向,并且存在性別差異。
  2.孕期肥胖通過下調(diào)GR的表達(dá)來增加AT2R基因的表達(dá),從而增加子代缺血再灌注損傷的敏感性,并且存在性別差異。
  全文結(jié)論:
  本研究采用妊娠期肥胖動物模型探討了血管緊張素II受體在孕期肥胖對子代心功能影響中的作用。孕期肥胖改變胎鼠心臟結(jié)構(gòu)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論