母體高鹽飲食對子代高血壓程序化的影響.pdf

1、背景與目的：高血壓病為臨床常見病與高發(fā)病，其發(fā)病機(jī)理仍未完全闡明。腎素血管緊張素系統(tǒng)參與了機(jī)體水鈉代謝。心臟、腎臟及大腦是高血壓危害的重要靶器官。目前認(rèn)為母體子宮內(nèi)的環(huán)境因素與其成年子代的高血壓發(fā)生有重要關(guān)系。妊娠期高鹽因素可能影響胚胎腎素血管緊張素系統(tǒng)的發(fā)育進(jìn)而造成高血壓相關(guān)的靶器官的發(fā)育問題。鑒于上述問題，本課題研究母體高鹽飲食對成年子代高血壓的影響。主要研究： 1、妊娠期母鼠給于8%氯化鈉飲食，觀察子宮內(nèi)胎鼠的血管緊張素系

2、統(tǒng)發(fā)育。 2、血管緊張素系統(tǒng)對水鈉代謝的調(diào)節(jié)。 3、母體高鹽飲食對子宮內(nèi)胎鼠的高血壓相關(guān)的靶器官（心，腦，腎）的發(fā)育的影響。 4、AT1b受體基因的表觀遺傳學(xué)機(jī)制參與的母體高鹽飲食對胎鼠心臟的作用。 方法： 1．檢測：每天稱量母鼠體重，攝食量，飲水量，排尿量；檢測血壓，尿鈉離子濃度，檢測母鼠和胎鼠的血漿滲透壓和血液鈉離子的濃度。 2．用放射免疫法檢測母鼠和胎鼠血液中血管緊張素Ⅱ和醛固酮的濃

3、度以及胎鼠心臟和腎臟組織中血管緊張素Ⅱ濃度。 3．用透射電鏡方法觀察胎鼠的心臟及腎臟組織在母體高鹽因素的影響下超微結(jié)構(gòu)的變化。 4．用western blot和熒光定量PCR的方法檢測胎鼠腎臟、心臟及腦內(nèi)AT1和AT2受體的蛋白和mRNA的表達(dá)，檢測胎鼠肝臟及腦內(nèi)血管緊張素原mRNA的表達(dá)。 5．體外原代細(xì)胞培養(yǎng)胎鼠心肌細(xì)胞及腎臟系膜細(xì)胞，流式細(xì)胞儀分析心肌細(xì)胞及腎臟系膜細(xì)胞的細(xì)胞周期，并研究AngⅡ?qū)ε囵B(yǎng)細(xì)胞的

4、影響。 6．用焦磷酸測序法分析胎鼠心臟AT1b受體基因的甲基化模式。 結(jié)果： 1．高鹽飲食組的母鼠的飲水量、24小時(shí)尿量和尿中鈉離子濃度增多，但攝食量及體重沒有改變；母鼠在高鹽飲食的第二周開始有血壓增高的趨勢，但沒有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。GD21高鹽飲食組母鼠和胎鼠血漿滲透壓和血液鈉離子濃度沒有變化。 2．高鹽飲食組母鼠和胎鼠血漿AngⅡ和醛固酮濃度降低，胎鼠心臟和腎臟組織AngⅡ濃度升高。 3．高鹽

5、飲食組胎鼠心臟超微結(jié)構(gòu)的變化：心肌細(xì)胞線粒體嵴減少、空泡化，心肌纖維排列紊亂，部分心肌纖維原消失；腎臟超微結(jié)構(gòu)的變化：腎臟足突減少，足突融合，基底膜裸露，部分基底膜消失。 4．胎鼠心臟組織AT1a，AT1b mRNA表達(dá)增多，AT1受體蛋白表達(dá)增多，AT2受體mRNA和蛋白表達(dá)沒有改變；胎鼠腎臟組織AT1b mRNA表達(dá)增多，AT1受體蛋白表達(dá)增多，AT1a mRNA表達(dá)無變化，AT2受體的mRNA和蛋白的表達(dá)沒有改變；胎鼠腦組

6、織AT1a，AT1b，AT2受體mRNA表達(dá)增多，血管緊張素原mRNA表達(dá)降低，AT1，AT2受體蛋白表達(dá)增多；胎鼠肝臟血管緊張素原mRNA表達(dá)增高。 5．體外原代細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)：高鹽飲食組胎鼠心肌細(xì)胞和腎臟系膜細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)。AngⅡ刺激心肌細(xì)胞和腎臟系膜細(xì)胞增殖，AT1受體阻斷劑（losartan）能部分翻轉(zhuǎn)AngⅡ?qū)?xì)胞生長的刺激作用。AT2受體阻斷劑（PD123319）不能抑制AngⅡ?qū)?xì)胞生長的刺激作用。 6．

7、高鹽飲食組胎鼠心臟AT1b受體啟動(dòng)子區(qū)域—1499，—1511，—1517，—1522，—1566序列甲基化程度下調(diào)。 結(jié)論： 1．妊娠期間母體高鹽飲食使母鼠的飲水及腎臟排水排鈉增多以保證母鼠和胎鼠的水鈉代謝平衡。在攝入高鹽的條件下，母鼠的血壓有逐漸升高趨勢。 2．妊娠期間母體高鹽飲食抑制了母鼠和胎鼠外周血管緊張素系統(tǒng)。 3．妊娠期間母體高鹽飲食影響了胎鼠心臟和腎臟的發(fā)育。 4．妊娠期間母體高鹽飲