豬頸動脈支架術后PPAR-γ的表達及對血管平滑肌表型轉化影響.pdf

1、近年來,隨著血管內介入技術及介入器材的不斷發(fā)展,腦血管支架植入治療作為一種新的診療方法,因其具有微創(chuàng)、安全及有效的特點,在缺血性卒中的二級預防中得到了廣泛的運用,顯著降低了卒中的復發(fā)率,并有效的改善了卒中患者的預后。但術后6個月有20％~30%的患者發(fā)生再狹窄,再狹窄的發(fā)生嚴重影響了腦血管支架植入術的遠期療效,因此支架內再狹窄是臨床面對的挑戰(zhàn),再狹窄的防治是腦血管病微創(chuàng)治療后的重點和難點。
　　目前,再狹窄發(fā)生機制尚未明確,臨床上

2、仍缺乏有效的防治手段,對再狹窄的機制進行深入研究是尋找行之有效防治途徑的前提。腦血管支架植入術后再狹窄的發(fā)生是一個復雜的過程,具有多種因素參與,其過程包括了血栓在血管內支架植入術后的早期形成、中晚期的內膜增生及血管重塑。既往針對血管再狹窄的防治研究著眼點主要在內膜的變化,阻止血管內膜和基質增生,包括藥物干預、新型支架技術等多集中于促進血管內膜的再內皮化,而血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)

3、的表型轉化在近年來支架植入后再狹窄中的作用備受學者們的關注,成為研究血管重構過程中的熱點。研究結果提示VSMC的增殖、遷移是血管再狹窄的主要原因和病理生理基礎。而過氧化物酶體增殖物激活受體-γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPAR-γ)對腦血管重構有重要的調控作用。
　　PPAR-γ是一種核轉錄因子,需要配體激活發(fā)揮生物學作用,具有多種生物學效應,如調節(jié)脂質代謝

4、和糖代謝、抗動脈粥樣硬化、誘導腫瘤細胞分化和凋亡等。豬與人在血管支架植入后的組織病理學變化基本相同,本實驗擬采用小型豬建立頸動脈支架植入術后模型并對部分支架植入動物模型給予PPAR-γ激動劑藥物羅格列酮干預,觀察PPAR-γ的表達變化及對VSMC表型轉化的影響,旨在探討PPAR-γ對VSMC表型轉化的影響及其機制,為臨床腦血管支架植入后再狹窄的防治提供理論依據(jù)。
　　目的:通過建立豬頸動脈支架植入模型,應用血管造影、病理學研究、分

5、子生物學及免疫組織化學等方法,觀察支架段血管病理組織形態(tài)及核轉錄因子PPAR-γ、平滑肌22α(smooth muscle22 alpha,SM22α)蛋白的表達變化及對血管重構的影響,初步探討PPAR-γ在豬頸動脈支架植入后再狹窄中的作用及機制。
　　方法:健康巴馬小型豬12只,隨機分為3組,植入支架組、植入支架并給予羅格列酮(rosiglitazone,ROSI)喂養(yǎng)組和正常對照組。正常對照組不植入支架,其余兩組于隨機一側頸動

6、脈行球囊擴張并植入金屬裸支架(bare metal Stent,BMS),于支架植入術前、術后即刻以及術后12周行血管造影了解血管重構的情況。于術后12周處死動物,取支架植入段頸動脈,利用普通病理技術、免疫組織化學及蛋白質印跡(Western Blot, WB)方法檢測頸動脈血管病理變化以及PPAR-γ與SM22α的表達變化。
　　結果:
　　1)血管造影顯示豬頸動脈球囊擴張并支架植入時的直徑為(4.88±0.12)mm,支

7、架植入以后12周再造影發(fā)現(xiàn)支架內狹窄,支架內直徑為(3.41±0.15)mm,狹窄程度為(1.46±0.14) mm;ROSI組支架植入時的直徑為(5.08±0.11)mm,與支架植入組支架植入血管時的直徑無顯著差異(P>0.05),支架植入以后12周造影,支架內直徑為(4.17±0.12)mm,狹窄程度為(0.91±0.13) mm。血管支架植入12周后血管造影顯示支架植入組較ROSI組的血管狹窄程度顯著(P<0.05);
　　

8、2) HE染色結果發(fā)現(xiàn)支架植入組可見血管中膜層彈力纖維排列紊亂,增生內膜可見大量 VSMC,ROSI組血管 HE染色中膜層彈力纖維排列基本有序,血管內 VSMC增生不明顯。免疫組化結果示:PPAR-γ在正常對照組血管中的表達評分為(5.85±0.29),在支架植入組血管的表達評分為(0.90±0.22),在ROSI組血管的表達評分為(5.04±0.46);PPAR-γ在支架植入組血管中的表達評分較正常對照組與ROSI組低(P<0.05)

9、,PPAR-γ在ROSI組與正常對照組中的表達無顯著差異(P>0.05);
　　3) Western blot結果示:PPAR-γ/SM22α在正常對照組的表達為(19.87±5.33)%/(68.85±9.73)%,在支架植入組的表達為(3.12±1.42)%/(16.72±5.34)%,在ROSI組的表達為(23.17±4.23)%/(58.63±12.81)%。PPAR-γ/SM22α在支架植入組的表達低于正常對照組的表達(

10、P<0.05),VSMC表型由收縮型向合成型轉化;PPAR-γ/SM22α在 ROSI組的表達高于支架植入組(P<0.05),VSMC表型由合成型向收縮型轉化;ROSI組與正常對照組相比,PPAR-γ/SM22α表達無顯著差異(P>0.05)。
　　結論:
　　1.支架植入可以誘發(fā)支架再狹窄;
　　2.支架植入后誘導的PPAR-γ表達變化可能通過調節(jié)血管平滑肌表型轉化參與了支架植入后再狹窄的調節(jié);
　　3. PP