特發(fā)性肺纖維化患者肺泡灌洗液及血清中白細(xì)胞介素4、12水平變化的意義.pdf

1、特發(fā)性肺纖維化患者肺泡灌洗液及血清中自細(xì)胞介素4、12水平變化的意義 間質(zhì)性肺疾病的發(fā)病率不斷增高，已經(jīng)成為威脅人類健康的一重要疾病。特發(fā)性肺纖維化(IPF)是間質(zhì)性肺疾病中較為重要的一種，肺纖維化發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明確，越來越多的研究表明細(xì)胞因子，特別是致炎性因子可能在本病的發(fā)生、發(fā)展過程中起著非常重要的作用。現(xiàn)在已有20余種細(xì)胞因子被證明與IPF有關(guān)。白細(xì)胞介素是其中較為重要的能作用于多種靶細(xì)胞的炎癥性單核細(xì)胞因子。白細(xì)胞

2、介素4(IL-4)、白細(xì)胞介素12(IL-12)分屬于兩個不同類型的細(xì)胞因子。Th1型細(xì)胞因子與Th2型細(xì)胞因子的比例失衡在肺纖維化中的作用越來越為人們所重視。本研究的目的就是探討IL-4、IL-12在IPF進(jìn)程中所起的作用和它們的臨床意義，以期待對IPF的發(fā)病機(jī)制有更全面的認(rèn)識。 實(shí)驗(yàn)材料 研究對象：(1)IPF組：IPF患者30名，所有患者均經(jīng)臨床、肺功能檢查、血?dú)夥治?、肺HRCT檢查，并經(jīng)支氣管肺泡灌洗檢查(BAL

3、)和經(jīng)支氣管肺活檢(TBLB)除外其他間質(zhì)性肺疾病。符合美國胸科學(xué)會(ATS)和歐洲呼吸學(xué)會(ERS)共同提出的有關(guān)IPF的非創(chuàng)傷性標(biāo)準(zhǔn)．所有患者檢查前未經(jīng)糖皮質(zhì)激素及其它免疫抑制劑治療。(2)對照組：健康非吸煙的自愿獻(xiàn)血者30名做為血清對照組。以胸痛為自覺癥狀來我院要求進(jìn)行纖維支氣管鏡檢查患者9名，經(jīng)肺功能、肺HRCT和纖維支氣管鏡檢查未見異常的健康者，作為BALF對照組。 實(shí)驗(yàn)儀器：Olympus 260型纖維支氣管鏡，Un

4、iversal 32R離心機(jī)，BIO-RAD酶標(biāo)儀。實(shí)驗(yàn)試劑：IL-4和IL-12試劑盒均購自武漢博士德生物醫(yī)學(xué)公司。 實(shí)驗(yàn)方法 1．應(yīng)用Olympus 260型內(nèi)徑5.9mm的電子支氣管鏡做支氣管肺泡灌洗。 2．BALF用12目的無菌紗布過濾后注入經(jīng)高壓消毒的塑料離心管中，離心后注入無菌透析袋，浸入50％的聚乙二醇溶液中，24小時后加人生理鹽水(量為原BALF量的1/10)，取濃縮液封蓋冷凍保存(-20℃)備

5、用。于支氣管肺泡灌洗后立即采肘靜脈血3ml，對靜脈血進(jìn)行離心，取上清冷凍保存(-20℃)備用。檢測時取其上清進(jìn)行IL-4和IL-12水平測定。 3．用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測血清和BALF中IL-4和IL-12水平。 4．統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所得數(shù)據(jù)以±s表示，采用spss軟件包行t檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1．IPF組與對照組BALF及血清中IL-4、IL-12的水平及比較 IPF組患者BALF中IL-4水平高于BALF對照

6、組，IL-12水平低于對照組；IPF組血清IL-4水平高于血清對照組，IL-12水平與血清對照組相比差異無顯著性。 2．IPF組患者血清和BALF中IL-4、IL-12水平的比較 IPF組患者BALF中IL-4水平與血清相比差異無顯著性；IL-12水平低于血清。 雖然引起IPF的發(fā)病機(jī)理目前尚未完全明確，但是近來研究人員對IPF的發(fā)病機(jī)制已有了越來越深人和廣泛的解。研究表明，在某種致病因素的作用下，細(xì)胞因子特別是

7、致炎性因子可能在本病的發(fā)生、發(fā)展過程中起著非常重要的作用?，F(xiàn)在已有20余種細(xì)胞因子被證明與IPF有關(guān)。白細(xì)胞介素是其中較為重要的能作用于多種靶細(xì)胞的炎癥性單核細(xì)胞因子。IL-4是特征性Th2型細(xì)胞因子，IL-12為重要的Thl型細(xì)胞因子。Thl型細(xì)胞與Th2型細(xì)胞的比例失衡在肺纖維化中的作用越來越為人們所重視。 研究表明，Th2細(xì)胞來源的因子如IL-4等可擴(kuò)大炎癥反應(yīng)引起肺結(jié)構(gòu)重塑，刺激肺成纖維細(xì)胞增生伴膠原和纖維素沉積增多引起

8、肺泡壁基底膜增厚和彌漫性上皮下纖維化。研究發(fā)現(xiàn)，損傷的肺泡上皮細(xì)胞高表達(dá)IL-4，IL-4是成纖維細(xì)胞的趨化因子，誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞增殖并增加細(xì)胞外膠原生成，且通過抗凋亡作用促進(jìn)纖維化。 我們的研究結(jié)果顯示：LPF患者的BALF與血清中IL-4水平高于正常人(PO.05)。說明IL-4的增高是一種全身行為。目前認(rèn)為,Ih2型細(xì)胞因子增多可以導(dǎo)致肺纖維化，本

9、試驗(yàn)結(jié)果支持這一觀點(diǎn)。 IL-12主要由活化的巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和中性粒細(xì)胞產(chǎn)生，有致炎和免疫調(diào)節(jié)作用。在Th細(xì)胞亞群的分化中發(fā)揮重要作用，是Thl細(xì)胞生長所必需的細(xì)胞因子，可以促使Thl細(xì)胞的增殖分化產(chǎn)生Thl型細(xì)胞因子，抑制Th2細(xì)胞的增殖分化。IL-12可以誘導(dǎo)活化的T細(xì)胞和NK細(xì)胞分泌IFN-γ和TNF。 通過本試驗(yàn)觀察IPF患者血清中IL-12水平與正常人血清中IL-12的水平無明顯差異(P>O.05

10、)，而BALF中的IL-12水平明顯低于正常人(P