柳穿魚黃素誘導細胞凋亡的機制研究.pdf

1、柳穿魚黃素是黃酮類的化合物，主要存在于大薊科飛機草等植物當中。柳穿魚黃素具有促凋亡的活性，但目前其促凋亡活性的機制還不是很清楚。孤兒核受體Nur-77的經(jīng)典的促凋亡機制是Nur-77出核后定位到線粒體上，并與bcl-2相互作用，引發(fā)線粒體介導的細胞凋亡。論文中我們發(fā)現(xiàn)柳穿魚黃素能夠通過影響Nur-77的亞細胞定位來調節(jié)Nur-77/bcl-2介導的凋亡通路。我們的數(shù)據(jù)顯示，柳穿魚黃素能夠有效的激活JNK信號通路，并通過JNK信號通路磷酸

2、化Nur-77，而Nur-77磷酸化是Nur-77出核的必要條件。使用JNK的抑制劑可以明顯的減弱柳穿魚黃素對Nur-77的磷酸化，以及柳穿魚黃素引起的細胞凋亡。我們的研究發(fā)現(xiàn)了一個有趣的現(xiàn)象，JNK信號通路的激活以及Nur-77的磷酸化都依賴于核受體RARγ的存在。利用siRNA干擾技術，沉默掉RARγ后我們發(fā)現(xiàn)Nur-77的磷酸化以及JNK信號通路的激活都被明顯的減弱。RARγ與Nur-77存在著密切的調控關系，我們發(fā)現(xiàn)在不同的細胞

3、系中轉入外援的RARγ都能夠在不同程度上上調Nur-77的水平。本論文數(shù)據(jù)顯示RARγ可以穩(wěn)定Nur-77的蛋白水平。二者之間存在直接的相互作用，并且柳穿魚黃素可以加強這一作用。
　　柳穿魚黃素誘導的細胞凋亡也是依賴于Nur-77的出核，我們使用LMB抑制Nur-77的出核后發(fā)現(xiàn)，柳穿魚黃素誘導的細胞凋亡也被明顯的削弱。我們的數(shù)據(jù)還顯示Nur-77出核定位到線粒體上使Bcl-2減少，釋放出有活性的Bax從而影響線粒體的膜電位釋放細