疏肝理肺方對慢性應激條件下哮喘大鼠血清皮質(zhì)酮及肺組織中TGF-β1-Smad3表達的影響.pdf

1、目的：依據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學心理學應激理論和實驗研究方法，結合支氣管哮喘的特點，復制慢性應激性哮喘大鼠模型，對慢性應激性哮喘大鼠用疏肝理肺方進行干預，測定血清皮質(zhì)酮含量及肺組織TGF-β1/Smad3的表達水平變化，探討疏肝理肺方對慢性應激性哮喘的作用機制。
　　方法：將40只SD雄性大鼠在正常環(huán)境下飼養(yǎng)一周后，采用隨機數(shù)表法分為4組，即正常對照組、應激哮喘組、地塞米松組、疏肝理肺組。采用卵蛋白皮下注射致敏、氣道吸入刺激氣道上皮激發(fā)，并加用

2、慢性不可預見性溫和應激法(CUMS)，以復合方法復制慢性應激性哮喘，第15天開始，地塞米松組及疏肝理肺組每天分別以地塞米松及疏肝理肺方灌胃。持續(xù)復合刺激8周后，腹主動脈取血，ELISA檢測血清皮質(zhì)酮含量;取左側(cè)肺組織做HE染色和免疫組織化學染色，觀察大鼠肺組織炎癥細胞浸潤情況、測定支氣管管腔的內(nèi)周長、管壁面積，支氣管平滑肌面積，定位及半定量測定肺組織中TGF-β1及Smad3的蛋白表達情況;右肺組織用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)

3、法測定肺組織TGF-β1及Smad3的mRNA表達水平。
　　結果：ELISA檢測發(fā)現(xiàn)應激哮喘組血清皮質(zhì)酮顯著高于正常對照組(P＜0.05)，而地塞米松組和疏肝理肺組較哮喘模型組明顯降低(P＜0.05);HE染色顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，應激哮喘組大鼠支氣管、肺泡及肺間質(zhì)充斥大量炎癥細胞、粘膜層腫脹充血、皺折增多，大鼠支氣管壁面積和氣道平滑肌面積較正常對照組顯著增高(P＜0.05)，與應激哮喘組相比，地塞米松組及疏肝理肺組上述炎癥癥狀明顯減

4、輕，支氣管壁面積和氣道平滑肌面積厚度明顯減小(P＜0.05);免疫組化顯示，TGF-β1及Smad3的蛋白主要表達在氣道上皮、平滑肌及炎癥細胞中，與正常對照組相比，應激哮喘組大鼠肺組織TGF-β1及Smad3的蛋白表達明顯升高(P＜0.05)，地塞米松及疏肝理肺組TGF-β1及Smad3的蛋白表達較應激哮喘組顯著降低(P＜0.05);RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，應激哮喘組大鼠肺組織TGF-β1及Smad3的mRNA表達較正常對照組明顯升高(P