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1、東南大學(xué)碩士學(xué)位論文5氮雜胞苷對(duì)HT29細(xì)胞DLC1mRNA表達(dá)和生物學(xué)行為的影響姓名:伍健申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):病理與病理生理指導(dǎo)教師:黃培林20050601中文摘要中文摘要5氮雜胞苷對(duì)HT29細(xì)胞DLc1mRNA表達(dá)和生物學(xué)行為的影響1研究生:伍健導(dǎo)師:黃培林教授東南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系目的:通過研究去甲基化藥物(5氮雜胞苷)對(duì)人結(jié)腸癌系HT29細(xì)胞DLc一1mRNA表達(dá)以及對(duì)細(xì)胞增殖、粘附活性、分化和早期凋亡的影響,初步探討H
2、T29細(xì)胞系DLc1mRNA的表達(dá)和細(xì)胞生物學(xué)行為之間的相關(guān)性。方法:1不同濃度的5氮雜胞苷加入培養(yǎng)中的結(jié)腸癌HT29細(xì)胞系共同培養(yǎng)3天。2RTPCR對(duì)DLC1基因mRNA的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。3四唑鹽比色法、流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞動(dòng)力學(xué)改變進(jìn)行觀察。4同質(zhì)性、異質(zhì)性粘附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的改變。5堿性磷酸酶染色、流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)細(xì)胞分化和早期凋亡。6采用統(tǒng)計(jì)學(xué)sAs軟件進(jìn)行析因分析和相關(guān)性分析。結(jié)果:15氮雜胞苷處理后的細(xì)胞體積縮小,大小
3、趨向均勻,排列趨向整齊和向腺腔分化的趨勢(shì)。2DLc一1基因mIⅢA表達(dá):給藥前HT29細(xì)胞系DLc1基因mRNA表i翻艮弱,給藥后表達(dá)明顯增強(qiáng),且有劑量依賴性,而用藥前后對(duì)照組HeDG2細(xì)胞系DLC—l基因mRNA表達(dá)無明顯變化。3MTT實(shí)驗(yàn)顯示不同濃度5氮雜胞苷處理后,細(xì)胞的增殖活性明顯受到抑制,且有劑量依賴性(P0001);O“l(fā)、25肛l、50山和100肛1/L不同濃度5氮雜胞處理后細(xì)胞周期中的GoG1期比例明顯增高,分別為58%
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