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文檔簡介
1、第一部 HDAC4、VEGFR-1在肝癌細(xì)胞株HepG2的表達(dá)
目的:研究HDAC4和VEGFR-1在肝癌細(xì)胞株HepG2中的表達(dá)
方法:體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞株HepG2,用免疫細(xì)胞化學(xué)的方法及Western-blotting檢測HDAC4、VEGFR-1表達(dá)。
結(jié)果:免疫細(xì)胞化學(xué)試驗(yàn)顯示,HDAC4蛋白陽性表達(dá)呈棕色顆粒,主要位于細(xì)胞核,胞漿也有表達(dá)。VEGFR-1蛋白陽性表達(dá)呈淺棕色顆粒,位于細(xì)
2、胞漿。Western-blotting方法顯示,HDAC4、VEGFR-1均有條帶顯示其在肝癌細(xì)胞株HepG2中表達(dá)。
結(jié)論:HDAC4及VEGFR-1在肝癌細(xì)胞株HepG2中有表達(dá)
第二部分:HDAC4、VEGFR-1之間的相互影響
目的:觀察組蛋白去乙?;敢种苿?Histone deacetylase inhibitors,HDACI)苯丁酸鈉(SPB)作用于肝癌細(xì)胞株HepG2后,HDA
3、C4、VEGFR-1之間的相互影響。
方法:體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞株HepG2經(jīng)SPB作用后,用免疫細(xì)胞化學(xué)的方法及Western-blotting觀察HDAC4、VEGFR-1之間的變化。
結(jié)果:免疫細(xì)胞化學(xué)顯示SPB作用24h后,HDAC4蛋白表達(dá)較無藥物作用時(shí)弱,VEGFR-1蛋白表達(dá)較無藥物作用時(shí)弱,陽性細(xì)胞數(shù)減少;Western-blotting顯示經(jīng)SPB作用后,HDAC4表達(dá)下調(diào),而VEGFR-1表達(dá)
4、也相應(yīng)的下調(diào),呈現(xiàn)劑量-時(shí)間依賴關(guān)系。
結(jié)論:HDACI作用于肝癌細(xì)胞株HepG2后,HDAC4的表達(dá)受到抑制,VEGFR-1的表達(dá)下調(diào)。說明HDACI可能抑制HDAC4、VEGFR-I的表達(dá)。
第三部分:HDAC4抑制劑SPB對肝癌細(xì)胞株HepG2侵襲、轉(zhuǎn)移及黏附的影響
目的:觀察HDAC4抑制劑SPB對肝癌細(xì)胞株HepG2侵襲黏附的影響
方法:應(yīng)用transwell小室觀察HD
5、AC抑制劑SPB對肝癌細(xì)胞株HepG2侵襲、轉(zhuǎn)移的影響作用,應(yīng)用MTT方法測定HDAC抑制劑SPB對HepG2的粘附作用的影響。
結(jié)果:應(yīng)用transwell小室觀察經(jīng)SPB作用后,處理組、對照組細(xì)胞的穿膜細(xì)胞的數(shù)分別為161.80+-46.796、329.20+-55.993,抑制率達(dá)到50.85%,有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p
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