β-amyloid寡聚體調(diào)節(jié)Munc-18表達(dá)及其相關(guān)效應(yīng)研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文β-amyloid寡聚體調(diào)節(jié)Munc-18表達(dá)及其相關(guān)效應(yīng)研究姓名：錢(qián)淑文申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：神經(jīng)生物學(xué)指導(dǎo)教師：朱粹青20040520復(fù)旦 大學(xué)碩士學(xué)位論文 卜 淀 粉樣蛋白 寡聚 體調(diào)節(jié)M u n c - 1 8 表 達(dá)及 其相關(guān)效 應(yīng) 研究3 .用S H - S Y 5 Y細(xì)胞轉(zhuǎn)染了 外 源m u n c - 1 8 基因， 然后進(jìn)行了 免疫熒光雙標(biāo)染色，結(jié)果顯示， 過(guò)表達(dá)M u n c - 1 8 的 細(xì)

2、胞內(nèi) 磷酸化T a u 蛋白的 水平增加。為了 研究A p 寡 聚體誘導(dǎo)的M u n c - 1 8 表 達(dá)變化是否與T a u 磷 酸化相關(guān)， 我們對(duì)A p 寡聚體誘導(dǎo)M u n c - 1 8 表 達(dá)變 化的 細(xì)胞， 同 時(shí) 進(jìn)行磷酸 化T a u 蛋白 檢 測(cè)。W e s t e r n b l o t 結(jié) 果 顯示， 當(dāng) 處 理細(xì) 胞的A p 寡聚 體 濃度是1 n M時(shí)， A T 8 抗體檢 測(cè)到的 磷酸化T a u 蛋白

3、 水平 變 化與M u n c - 1 8 較一致， 而5 n M A p 作用 后，M u n c - 1 8 表 達(dá) 抑 制， 但T a u 蛋白 磷 酸 化 仍 有增 加。 另 外， A p 寡 聚 體 腦 室內(nèi)注射后w e s t e m b l o t 檢測(cè)到大鼠 海馬內(nèi) 磷酸化T a u 蛋白 水平增加， 也沒(méi)有與M u n c - 1 8 表 達(dá) 變化的 趨勢(shì)完 全一 致。 提 示 A 日 可 誘導(dǎo) T a u磷 酸

4、化機(jī)制， 但M u n c - 1 8 可能只參與其中部分機(jī)制。4 . 最后， 我 們觀 察了A p 寡 聚體 對(duì)p - 淀粉 樣蛋白 前 體蛋白 ( A P P ) 的 影 響。 免疫 組織化學(xué) 和w e s t e r n b l o t 顯示A p 寡 聚體 ( 1 . 6 V M x 3 j . t 1 ) 的 作 用沒(méi) 有使 大鼠海馬內(nèi) 總的A P P 發(fā)生顯 著變 化， 但是 我們 觀察到G o l g i 體內(nèi) 的 酶

5、切形 成的分泌型A P P 片段減少，突觸小體內(nèi)A P P 也減少。總 之， A p 1 - 4 。 寡 聚體可以 調(diào)節(jié) 培 養(yǎng)細(xì)胞和 大鼠 腦內(nèi)M u n c - 1 8的 水 平; 同 時(shí)A p 寡聚 體可以 誘導(dǎo) 遞 質(zhì)釋放、 T a u 蛋白 磷酸化、 A P P 轉(zhuǎn) 運(yùn)代 謝的 變化。 通 過(guò)比 較A p 寡 聚體作 用后M u n c - 1 8 的 變 化以 及其它相 應(yīng)效 應(yīng)， 我 們推測(cè)M u n c - 1 8 可能