肌醇六磷酸通過PI3K-Akt信號通路對結(jié)腸癌HT-29細胞生長的影響.pdf

1、目的：通過研究PI3K/Akt信號通路在肌醇六磷酸(inositol hexaphosphate,IP6)抑制結(jié)腸癌HT-29細胞生長中的作用，探討IP6誘導結(jié)腸癌HT-29細胞凋亡的機制。
　　方法：1.體外培養(yǎng)結(jié)腸癌HT-29細胞，使用不同濃度的IP6（0μg/mL，50μg/mL，100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL）進行干預，并依此濃度分組，干預24 h和48h。
　　2. MTT法檢測不同濃度的IP

2、6（0μg/mL，50μg/mL，100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL）對結(jié)腸癌細胞分別干預24h和48h生長抑制作用效果。
　　3.應用流式細胞儀技術(shù)，采用AnnexinV-FITC/PI雙染法檢測不同濃度IP6組對結(jié)腸癌細胞干預48h后的細胞凋亡率。
　　4. Western-blot檢測PI3K、pAkt、Akt和caspase-9蛋白的表達情況。
　　5.Real-time PCR檢測PI3K、

3、Akt、caspase-9、mTOR和NF-κ B mRNA的表達情況。
　　結(jié)果：1.隨IP6干預濃度的增加和時間的延長，IP6對HT-29細胞生長的抑制作用逐漸增強且有顯著的時間-劑量依賴性。
　　2.HT-29細胞經(jīng)IP6作用48h后,隨著IP6濃度的增加，HT-29細胞的凋亡增加，且IP6主要誘導HT-29細胞發(fā)生早期凋亡。
　　3.在IP6干預48h后，隨著IP6干預濃度的增加，PI3K,Akt及pAkt的表

4、達逐漸降低，并呈濃度依賴性（P＜0.05）,隨著IP6濃度的增加，caspase-9表達逐漸增加，呈濃度依賴性（P＜0.05）。
　　4.在IP6干預48h后，隨著IP6干預濃度的增加，PI3K、Akt和mTOR的mRNA的表達逐漸降低，而NF-κ B及caspase-9的mRNA表達逐漸增加（P＜0.05）。
　　結(jié)論：1.IP6能夠抑制HT-29結(jié)腸癌細胞的增殖，并呈濃度依賴性。
　　2.IP6能夠誘導HT-29結(jié)